ФС.2.1.0407. Диацереин

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Диацереин	ФС.2.1.0407
Диацереин
Diacereinum	Вводится впервые

 

C19H12O8	М.м. 368,29
[13739-02-1]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4,5-Бис(ацетилокси)-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % диацереина C₁₉H₁₂O₈ в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в диметилацетамиде, мало растворим в тетрагидрофуране, практически нерастворим в воде и этаноле.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диацереина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытание проводят в защищённом от света месте.

1. Примеси В и Н

Лимонной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,4 г лимонной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—лимонной кислоты раствор 80:275:645.

Раствор А. Растворяют 14,7 г натрия хлорида и 18,8 г глицина в 500 мл воды.

Раствор Б. Смешивают 25,3 мл натрия гидроксида раствора 2 % и 74,6 мл раствора А, при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % или серной кислоты раствором 1 М до 9,5.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 30 мл натрия гидроксида раствора 2 %, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре 33 °С досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в тетрагидрофуране, доводят объём раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают полученный раствор ультразвуком в течение не более 30 с и охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 2 % до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 2 % до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора и 25 мл натрия гидроксида раствора 2 %, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре 33 °С досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.

Примечание – Время между растворением фармакопейного стандартного образца примеси В и экстракцией не должно превышать 30 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь В: 1,8-дигидрокси-3-(гидроксиметил)антрацен-9,10-дион [481-72-1].

Примесь Н: 3-[(ацетилокси)метил]-9,10-диоксоантрацен-1,8-диил диацетат [25395-11-3].

Хроматографические условия

Колонка	125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	16 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы	100 мкл;
Время хроматографирования	2,5-кратное от времени удерживания пика примеси В.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси В и испытуемый раствор.

Время удерживания примеси В – около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика диацереина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков примесей В и Н не должна превышать площадь пика примеси В на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В (не более 0,0015 %).

2. Другие примеси

Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 353 мл воды и 147 мл фосфорной кислоты концентрированной. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. ПФА—ПФБ 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 50 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М, 40 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора растворителем до метки (раствор содержит примеси D и E).

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца диацереина смеси примесей, содержащего примеси С и F, растворяют в смеси 0,5 мл тетрагидрофурана и 0,5 мл растворителя.

Примечание

Примесь С: 4,5-дигидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [478-43-3].

Примесь D: 5-(ацетилокси)-4-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [875535-35-6].

Примесь Е: 4-(ацетилокси)-5-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [875535-36-7].

Примесь F: (10S)-3-[(ацетилокси)метил]-10-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-β-D-глюкопиранозил)-9-оксоантрацен-1,8-диил диацетат [13928-72-8].

Хроматографические условия

Колонка	100 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1,2 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–3	80	20
3–13	80 → 60	20 → 40
13–20	60	40

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диацереин – 1 (около 13,5 мин); примесь D – около 1,1; примесь Е – около 1,15; примесь С – около 1,2; примесь F – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу диацереина смеси примесей.

Для идентификации пиков примесей D и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси D и примеси Е должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика диацереина должно быть не менее 100.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь С – 1,4; примесь D – 1,3; примесь Е – 1,3; примесь F – 9,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика каждой из примесей D и Е не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

— площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

— площадь пика примеси F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

-сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца диацереина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диацереина, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца диацереина и испытуемый раствор.

Содержание диацереина C₁₉H₁₂O₈ в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика диацереина на  хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина;
	a0	–	навеска фармакопейного стандартного образца диацереина, мг;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	W	–	потеря в массе при высушивании, %;
	Р	–	содержание диацереина в фармакопейном стандартном образце диацереина, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.