ФС.2.1.0340. Абакавира сульфат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Абакавира сульфат	ФС.2.1.0340
Абакавир
Abacaviri sulfas	Вводится впервые

(C14H18N6O)2·H2SO4	М.м. 670,74
[188062-50-2]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

[(1S,4R)-4-[2-Амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанола сульфат (2:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % абакавира сульфата (C₁₄H₁₈N₆O)₂·H₂SO₄ в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца абакавира сульфата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика абакавира на хроматограмме раствора стандартного образца абакавира сульфата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Родственные примеси

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Гептан—2-пропанол—диэтиламин 850:150:1.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Гептан—2-пропанол 500:500.

Растворитель. Трифторуксусная кислота—метанол 0,5:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в 30 мл растворителя, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 30 мл 2-пропанола и доводят объём раствора гептаном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца смеси стереоизомеров абакавира (содержит примесь 2 и 5), растворяют в 3 мл растворителя, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 3 мл 2-пропанола и доводят объём раствора гептаном до метки.

Примечание

Примесь 2 (транс-абакавир): [(1R,4R)-4-[2-амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол [783292-37-5].

Примесь 5 (энантиомер абакавира): [(1R,4S)-4-[2-амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол [136470-79-6].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Детектор	спектрофотометрический, 286 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %	Скорость потока, мл/мин
0–25	100	0	1,0
25–27	100 → 0	0 → 100	1,0
27–37	0	100	0,8
37–39	0 → 100	100 → 0	0,8
39–55	100	0	1,0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Абакавир – 1 (около 17 мин); примесь 2 – около 0,8; примесь 5 – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

— разрешение (R_S) между пиками примеси 2 и примеси 5 должно быть не менее 1,0;

— разрешение (R_S) между пиками примеси 5 и абакавира должно быть не менее 1,5.

Содержание примеси 5 в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

— примесь 5 – не более 0,3 %.

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода—трифторуксусная кислота 999,5:0,5.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода—метанол 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в воде, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца смеси родственных примесей абакавира (содержит примеси 1–4), растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1 (десциклопропил абакавир): [(1S,4R)-4-[2,6-диамино-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол [124752-25-6].

Примесь 2 (транс-абакавир): [(1R,4R)-4-[2-амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол [783292-37-5].

Примесь 3 (О-пиримидиновое производное абакавира): 9-[(1S,4R)-4-{[(2,5-диамино-6-хлорпиримидин-4-ил)окси]метил}циклопент-2-ен-1-ил]-N6-циклопропил-9H-пурин-1,6-диамин [1443421-69-9].

Примесь 4 (t-бутиловое производное абакавира): 9-[(1S,4R)-4-(трет-бутоксиметил)циклопент-2-ен-1-ил]-N6-циклопропил-9H-пурин-1,6-диамин [1443421-68-8].

Хроматографические условия

Колонка	150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–20	95 → 70	5 → 30
20–35	70 → 10	30 → 90
35,1–50	95	5

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Абакавир – 1 (около 17 мин); примесь 1 – около 0,65; примесь 2 – около 1,04; примесь 3 – около 1,33; примесь 4 – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками абакавира и примеси 2 должно быть не менее 1,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

— примесь 1 – не более 0,2 %;

— примесь 2 – не более 0,2 %;

— примесь 3 – не более 0,2 %;

— примесь 4 – не более 0,2 %;

— любая другая примесь – не более 0,1 % для каждой примеси;

— сумма примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Определение проводят в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца абакавира сульфата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца абакавира сульфата, растворяют в воде, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца абакавира сульфата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца абакавира сульфата:

— фактор асимметрии пика (A_S) абакавира должен быть не более 2,0;

— относительное стандартное отклонение площади пика абакавира должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание абакавира сульфата (C₁₄H₁₈N₆O)₂·H₂SO₄ в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика абакавира на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика абакавира на хроматограмме раствора стандартного образца абакавира сульфата;
	а1	–	навеска субстанции, мг;
	а0	–	навеска фармакопейного стандартного образца абакавира сульфата, мг;
	P	–	содержание абакавира сульфата в фармакопейном стандартном образце абакавира сульфата, %;
	W	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.