ФС.2.1.0057. Ампициллин тригидрат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ампициллин тригидрат	ФС.2.1.0057
Ампициллин
Ampicillinum trihydricum	Взамен ФС.2.1.0057.18

 

C16H19N3O4S·3H2O	М.м. 403,45

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-фенилацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота тригидрат.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % ампициллина C₁₆H₁₉N₃O₄S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

*Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочных гидроксидов.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр ампициллина тригидрата, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ампициллина тригидрата.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +280 до +305 в пересчёте на безводное вещество (0,25 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (0,25 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие ампициллин и его примеси, используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 оС не более 1 сут.

Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 0,5 мл 4 % раствора фосфорной кислоты, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М и 50 мл ацетонитрила и доводят водой до 1000 мл.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Смешивают 0,5 мл 4 % раствора фосфорной кислоты, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М и 400 мл ацетонитрила и доводят водой до 1000 мл.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца ампициллина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мг фармакопейного стандартного образца цефрадина, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора с 5,0 мл раствора стандартного образца ампициллина.

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы	50 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %	Режим
0 – tR	85	15	Изократический
tR – (tR+30)	85 → 0	15 → 100	Линейный градиент
(tR+30) – (tR+45)	0	100	Изократический
(tR+45) – (tR+60)	85	15	Изократический
tR – время удерживания ампициллина, определённое по хроматограмме раствора сравнения В.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (ПФА—ПФБ 850:150) разрешение (R) между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

— сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 5,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Вода. От 12 % до 15 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза. ПФА—ПФБ 850:150.

Хроматографируют раствор стандартного образца ампициллина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание ампициллина C₁₆H₁₉N₃O₄S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах () вычисляют по формуле:

где	S1	—	площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина;
	а1	—	навеска субстанции, мг;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного, мг;
	P	—	содержание ампициллина в фармакопейном стандартном образце ампициллина безводного, %.
	W	—	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

 

*Приводится для информации.