ФС.2.1.0089. Дексаметазон
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Дексаметазон | ФС.2.1.0089 |
Дексаметазон | |
Dexamethasonum | Взамен ФС.2.1.0089.18 |
|
|
C22H29FO5 |
М.м. 392,46 |
[50-02-2] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
11β,17,21-Тригидрокси-16α-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион.
Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % дексаметазона C22H29FO5 в пересчёте на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
Растворимость. Умеренно растворим в этаноле, мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дексаметазона.
2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.
Подвижная фаза (ПФ). Метанол―метиленхлорид 10:90.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца дексаметазона. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор А. В химический стакан вместимостью 50 мл помещают 12,5 мл серной кислоты концентрированной и смешивают с 37,5 мл уксусной кислоты ледяной.
Реактив для детектирования. Растворяют 0,25 г 2,4- дигидроксибензальдегида в 50 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют раствор А.
На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (5 мкг) и раствора сравнения (5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом для детектирования, нагревают при 90 оC в течение 35 мин или до появления пятен, охлаждают до комнатной температуры и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения.
3. Качественная реакция. Около 2 мг субстанции помещают в колбу с 2 мл серной кислоты концентрированной и взбалтывают до растворения. В течение 5 мин должно образоваться бледное красновато-коричневое окрашивание. К полученному раствору прибавляют 10 мл воды и перемешивают. Окрашивание должно исчезнуть.
ИСПЫТАНИЯ
Удельное вращение. От +86 до +92 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Растворы защищают от света и используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.
Подвижная фаза А (ПФА): Ацетонитрил―вода для хроматографии 250:750.
Подвижная фаза Б (ПФБ): Ацетонитрил.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 1,5 мл ацетонитрила и прибавляют 5 мл ПФА, обрабатывают раствор ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси B, F и G), растворяют в 0,5 мл ацетонитрила и прибавляют 1 мл ПФА, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры.
Раствор для идентификации. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона для идентификации пиков (содержит примеси J и K) в 0,5 мл ацетонитрила, прибавляют 1 мл ПФА, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят ПФА до 2 мл.
Примечание
ПримесьB:(бетаметазон) 11β,17,21-тригидрокси-16β-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион [378-44-9].
Примесь F:11β,21-Тригидрокси-16α-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион [382-67-2].
Примесь G: (дексаметазона ацетат) (11β,17-дигидрокси-16α-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-21-ил)ацетат [1177-87-3].
Примесь J: 17,21-дигидрокси-16α-метилпрегна-1,4-диен-3,11,20-трион [2036-77-3].
Примесь K: 17,21-дигидрокси-16α-метилпрегна-1,4,7,9(11)-тетраен-3,20-дион [1809224-82-5].
Условия хроматографирования
Колонка | 150 × 4,6 мм, октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии силикагель (5 мкм); |
Температура колонки | 45 °С; |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
Объём вводимой пробы | 20 мкл. |
Режим хроматографирования
Время, мин |
ПФА, % |
0–15 |
100 |
15–40 |
100 → 0 |
Хроматографируют раствор идентификации, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Дексаметазон –1 (около 15 мин); примесь J – около 0,9; примесь B – около 0,94; примесь K –около 1,3; примесь F – около 1,5; примесь G –около 1,7.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, F и G используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дексаметазона для идентификации пиков.
Для идентификации пиков примесей J и K используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дексаметазона для идентификации пиков.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси B и дексаметазона должно быть не менее 2,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
— площадь пика примеси G не должна превышать трёхкратную площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);
— площадь пика каждой из примесей В, F, J и K не должна превышать полуторакратную площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);
— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);
-сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).
Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят спиртом 96 % до метки.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 238,5 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения спирт 96 %.
Содержание дексаметазона C22H29FO5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
где |
– |
оптическая плотность испытуемого раствора; | |
394 |
– |
удельный показатель поглощения дексаметазона; | |
– |
навеска субстанции, г; | ||
– |
потеря в массе при высушивании, %. |
ХРАНЕНИЕ
В защищённом от света месте.