ФС.2.5.0129. Сабельника болотного корневища с корнями

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 г. N 120

Дата введения в действие: c 13.03.2024 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Сабельника болотного корневища с корнями	ФС.2.5.0129
Comari palustris rhizomata cum radicibus	Вводится впервые

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью (до отмирания надземной части), очищенные от земли, зелёных стеблей и листьев, разрезанные на куски и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего полукустарничка сабельника болотного – Comarum palustre L. сем. розоцветные – Rosaceae.

Содержит не менее 10,0 % суммы полифенольных соединений в пересчёте на (+)-катехин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы». Цельное сырьё. Куски корневищ или смесь кусков корневищ с корнями, укоренившихся стеблей с корнями и корней. Корневища и укоренившиеся стебли длиной до 30 см, диаметром от 0,3 до 0,7 см с чётко выраженными узлами, горизонтальные, прямые или слегка изогнутые, иногда разветвлённые, с довольно длинными междоузлиями. Поверхность корневищ продольно-морщинистая, матовая; укоренившихся стеблей – блестящая, с участками, лишёнными первичной коры. На узлах видны светло-коричневые или серовато-коричневые остатки стеблеобъемлющих черешков листьев длиной до 5 см или от узлов во все стороны отходят тонкие нитевидные корни длиной до 10 см. Корни многочисленные, переплетённые, иногда единичные, упругие. В центре корневищ и стеблей имеется полость, вследствие разрушения сердцевины, реже она заполнена губчато-волокнистой светло-коричневой сердцевинной паренхимой. Цвет корневищ и укоренившихся стеблей от светло-коричневого до тёмно-коричневого, почти чёрного, излом неровный, желтовато-белый, иногда зеленоватый; корней – снаружи от светло-коричневого до тёмно-коричневого цвета, иногда с беловатыми участками, из-за отслоившейся коры, на изломе – желтовато-белые. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения», раздел «Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата корневища и укоренившегося стебля должно быть видно вторичное непучковое строение; на поперечном срезе корневища в перидерме хорошо заметны клетки пробки, располагающиеся 7–8 радиальными рядами; за перидермой следуют вторичная кора, зона камбия и широкий слой древесины с заметно выраженными осенними и весенними элементами вторичной ксилемы; вторичная кора представлена вторичной и остатками первичной флоэмы. За узким кольцом камбия следует древесина, которая состоит из широких и узких сосудов, трахеид и древесной паренхимы. Сердцевинные лучи узкие, однорядные. На поперечном срезе укоренившегося стебля должны быть видны узкий слой перидермы, первичная кора, состоящая из клеток паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима), иногда заметных клеток колленхимы и эндодермы. В клетках первичной коры иногда встречаются крупные друзы кальция оксалата.

Перимедулярная зона сердцевины корневища и укоренившегося стебля состоит из толстостенных клеток, примыкающих к ксилеме. К центру паренхимные клетки сердцевины крупнее, их оболочки тоньше, они окрашены в серо-коричневый цвет, местами разорваны, в самом центре сердцевины клетки в основном разрушены: корневище полое, а стебли сохраняют больше неразрушенных клеток сердцевинной паренхимы.

На поперечном срезе корня должны быть видны широкая кора и древесина, радиус которой соизмерим с зоной коры. В коре преобладает перидерма. Пробка представлена несколькими чередующимися слоями, образующими концентрические пояса из тёмноокрашенных (суберинизированных) и более светлых (несуберинизированных) клеток, имеющих прямоугольную форму и толстые стенки. Сосуды древесины разного диаметра, расположены беспорядочно, сердцевинные лучи слабо выражены.

Рисунок 1 – Сабельника болотного корневища с корнями

1 – поперечный срез корневища (400×): а – пробка, б – зона камбия, в – сосуды древесины, г – паренхимные клетки перимедулярной зоны сердцевины; 2 – поперечный срез корня (200×): а – суберинизированные клетки пробки, б – несуберинизированные клетки пробки, в – флоэма, г – сосуды ксилемы.

 

Определение основных групп биологически активных веществ

ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—хлороформ 3:14:26.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 50 мл, помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, прибавляют 15 мл спирта 50 %, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца (+)-катехина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,001 г (+)-катехина, растворяют в спирту 50 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Железа (III) хлорида спиртовой раствор 1 %.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца (+)-катехина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают, в предварительно насыщенную в течение 30 мин, камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца (+)-катехина должна обнаруживаться зона адсорбции серо-зелёного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции серо-зелёного цвета на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца (+)-катехина, 3 зоны адсорбции серо-голубого цвета ниже уровня зоны адсорбции раствора стандартного образца (+)-катехина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 6,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 3 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения (зелёные стебли, черешки, листовые пластинки, соцветия, плоды), в т.ч. отделённых при анализе. Не более 12 %.

Органическая примесь. Не более 3 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор спирта 50 % подкислённого. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл спирта 50 %, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты 1 %, объём раствора доводят спиртом 50 % до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в коническую колбу вместимостью 250 мл с притёртой пробкой, прибавляют 50 мл спирта 50 % и взвешивают с точностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 50 % до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 мл фильтрата, прибавляют 10 мл спирта 50 % подкислённого, доводят объём раствора спиртом 50 % подкислённым до метки.

Раствор сравнения. Раствор спирта 50 % подкислённого.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 279 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, относительно раствора сравнения.

Содержание суммы полифенольных соединений в пересчёте
на (+)-катехин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где	A	—	оптическая плотность испытуемого раствора;
	а	—	навеска сырья, г;
	144	—	удельный показатель поглощения (+)-катехина в растворе спирта 50 % подкислённого при длине волны 279 нм ();
	W	—	влажность сырья, %.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».