ФС.2.1.0671. Бупивакаина гидрохлорид моногидрат
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 г. N 120
Дата введения в действие: c 13.03.2024 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Бупивакаина гидрохлорид моногидрат | ФС.2.1.0671 |
| Бупивакаин | |
| Bupivacaini hydrochloridum monohydricum | Вводится впервые |
|
|
|
| C18H28N2O·HCl·H2O |
М.м. 342,90 |
| [73360-54-0] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
(2RS)-1-Бутил-N-(2,6-диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамида гидрохлорид моногидрат.
Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % бупивакаина гидрохлорида C18H28N2O·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.
Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в воде, мало растворим в хлороформе.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца бупивакаина гидрохлорида.
2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции бупивакаина на хроматограмме раствора стандартного образца бупивакаина.
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.
Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол 0,1:100.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца бупивакаина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца бупивакаина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Реактив для детектирования. Калия йодовисмутата раствор разведённый.
На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца бупивакаина Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.
3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Угол вращения. От –0,10° до +0,10° в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).
Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М; рН полученного раствора должен быть не менее 4,7.
К полученному раствору прибавляют 0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М; рН полученного раствора должен быть не более 4,7.
Родственные примеси
1. Примесь F. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы используют свежеприготовленными.
Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 0,23 г натрия дигидрофосфата моногидрата и 3,626 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 10 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают равные объёмы полученного раствора и ацетонитрила.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.
Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца примеси F и 20 мг метилбензоата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.
Примечание
Примесь F: 2,6-Диметиланилин [87-62-7].
Хроматографические условия
| Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 30 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |
| Объём пробы | 50 мкл. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–10 |
100 |
0 |
|
10–15 |
100 → 80 |
0 → 20 |
|
15–25 |
80 |
20 |
|
25–28 |
80 →100 |
20 → 0 |
|
28–30 |
100 |
0 |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин – 1 (около 20 мин); примесь F – около 0,3; метилбензоат – около 0,4.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси F и метилбензоата должно быть не менее 4,0.
На хроматограмме раствора стандартного образца примеси F:
— отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее 40;
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F (не более 0,001 %).
2. Другие примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).
Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают около 25 мг метилбегената, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Испытуемый раствор. Растворяют около 50 мг субстанции в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл натрия гидроксида раствора 2 М и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют.
Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.
Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.
Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 10 мг субстанции, 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси В и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл раствора натрия гидроксида 10 % и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют. Полученный фильтрат помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.
Примечание
Примесь В: (2RS)-N-(2,6-Диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамид [15883-20-2].
Примесь Е: 6-(Бутиламино)-N-(2,6-диметилфенил)гексанамид [1330172-81-0].
Хроматографические условия
| Колонка | кварцевая капиллярная, 30 м ´ 0,32 мм, покрытая слоем полиметилфенилсилоксилана, 0,25 мкм; |
| Детектор | пламенно-ионизационный; |
| Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
| Деление потока | 1:12; |
| Скорость потока | 2,5 мл/мин; |
| Объём пробы | 1 мкл; |
Температурная программа
|
Время, мин |
Температура, °C |
|
| Колонка |
0 |
180 |
|
0–10 |
180 → 230 |
|
|
10–15 |
230 |
|
| Инжектор |
|
250 |
| Детектор |
|
250 |
Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин – 1 (около 10 мин); примесь В – около 0,7; примесь Е – около 1,1; внутренний стандарт – около 1,4.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
— разрешение (Rs) между пиками бупивакаина и примеси Е должно быть не менее 3,0;
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
— отношение площадей пиков примеси В и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %);
— отношение площадей пиков любой другой примеси и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,1 %);
— отношение суммы площадей пиков примесей и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %).
Не учитывают примеси, для которых отношение площади пика к площади внутреннего стандарта меньше отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).
Вода. Не менее 4,0 % и не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1).
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 5) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола».
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг бупивакаина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 20 мл воды и 25 мл спирта 96 %, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида этанольным.
Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 32,49 мг бупивакаина гидрохлорида C18H28N2O·HCl.
ХРАНЕНИЕ
В хорошо укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.