ФС.2.5.0107. Эвкалипта прутовидного листья

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 г. N 120

Дата введения в действие: c 13.03.2024 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Эвкалипта прутовидного листья	ФС.2.5.0107
Eucalypti viminalis folia	Взамен ФС.2.5.0107.18

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные поздней осенью, зимой или ранней весной и высушенные листья культивируемого дерева эвкалипта прутовидного – Eucalyptus viminalis Labill., сем. Миртовых – Myrtaceae.

Содержит:

цельное сырьё:

— не менее 1,0 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

— не менее 2,0 % суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин в сухом сырье;

измельчённое сырьё:

— не менее 0,8 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

— не менее 2,0 % суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Смесь двух типов листьев: листья старых ветвей – черешковые от узколанцентных до серповидно-изогнутых, остроконечные, плотные, длиной 4–27 см, шириной 0,5–5 см; листья молодых ветвей – сидячие с округлым основанием или с короткими черешками (длина черешков от 0,6 до 1,5 см, форма черешка на поперечном сечении овальная с адаксиальной стороны немного сплюснутая), удлинённо-яйцевидной формы, на верхушке заострённые, длиной 3,5–11 см, шириной 0,7–4 см. Встречаются листья, имеющие переходящую форму от удлинённо-яйцевидной до ланцетной. Листья голые с цельным, ровным или волнистым краем с многочисленными точками, просвечивающимися в проходящем ярком свете (вместилища с эфирным маслом).

Цвет листьев от светло-зелёного до серовато-зелёного, иногда с фиолетовым оттенком и слабым сизоватым налётом.

Запах характерный, усиливающийся при растирании.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков листьев различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм.

Цвет кусочков листьев от светло-зелёного до серовато-зелёного, иногда с фиолетовым оттенком и слабым сизоватым налётом.

Запах характерный, усиливающийся при растирании.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны фрагменты листа или его эпидермиса, состоящего из многоугольных клеток, покрытых толстым слоем кутикулы, выступающим в виде бугорков; устьица погружены в мезофилл; часто встречаются круглые пробковые пятна коричневого цвета; в мезофилле – округлые или овальные крупные схизогенные эфирномасличные вместилища с 1–2 слоями выделительных клеток; жилки с кристаллоносной обкладкой, состоящей как из призматических кристаллов, так и из друз оксалата кальция, в клетках мезофилла также встречаются друзы оксалата кальция.

При рассмотрении микропрепаратов черешка должны быть видны клетки эпидермиса мелкие, стенки которых сильно утолщены и кутинизированы. В коровой паренхиме по окружности под эпидермой расположены округлые вместилища разного размера с каплями эфирного масла жёлто-оранжевого цвета. Проводящие элементы, которые собраны в один крупный закрытый коллатеральный пучок, окружённые склеренхимными волокнами. В тканях флоэмы наблюдается значительное количество призматических монокристаллов.

Рисунок 1 – Эвкалипта прутовидного листья

1 – поперечный срез листа: фрагмент с пробковым пятном на поверхности листа (100×);
2 – поперечный срез листа: колленхима края листа (400×); 3 – верхний эпидермис с пробковым пятном на поверхности (100×); 4 – верхний эпидермис с просвечивающим под эпидермисом эфирномасличным вместилищем (400×); 5 – верхний эпидермис с устьицами (400×); 6 – нижний эпидермис с устьицами (400×); 7 – нижний эпидермис центральной жилки (400×); 8 – кристаллоносная обкладка жилки (400×); 9 – фрагмент коровой части черешка (поперечный срез) (100×); 10 – фрагмент поперечного среза листа с эфирномасличным вместилищем с каплей эфирного масла (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 10:90.

Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор спиртовой сернокислый (2).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл толуола и взбалтывают в течение 10 мин, затем полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят 5 мкл испытуемого раствора и 3 мкл судана красного G раствора 0,025 %.

Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, выложенную изнутри фильтровальной бумагой, предварительно насыщенную в течение 1 ч ПФ и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при 100–105 °С в течение 3–5 мин и сразу просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме судана красного G раствора 0,025 % должна обнаруживаться зона адсорбции красного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться две зоны адсорбции от красновато-фиолетового до фиолетового цвета, одна ниже зоны адсорбции судана красного G раствора 0,025 % спиртового и другая выше зоны адсорбции судана красного G раствора 0,025 % спиртового. Допускается обнаружение зоны адсорбции тёмного цвета на линии старта и других зон адсорбции.

2. Качественная реакция. Выпаривают 10,0 мл исходного раствора (см. раздел «Количественное определение», сумма фенолальдегидов) в фарфоровой чашке на водяной бане досуха, к сухому остатку прибавляют от 3 до 5 капель свежеприготовленного ванилина раствора 1 % в серной кислоте. Должно наблюдаться красно-коричневое окрашивание (терпеноиды).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Не более 3 %.

Другие части растения (веточек, бутонов, плодов). Не более 2 %.

Органическая примесь. Не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. Эфирное масло. Определение содержания эфирного масла проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 1 или 2, из 10,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, время перегонки 1 ч).

2. Сумма фенолальдегидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 100 мл спирта 80 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане при температуре от 70 до 80 °С в течение 1 ч., периодически перемешивая. Охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через беззольный фильтр, который промывают 5 мл спирта 80 %.

В делительную воронку вместимостью 200 мл количественно переносят полученный раствор, добавляют 20 мл гексана и взбалтывают, после расслоения гексановую фазу отделяют в сухую мерную колбу вместимостью 50 мл, извлечение повторно экстрагируют два раза порциями по 20 мл и 10 мл гексана, отделяют гексановые фазы, объединяют их с первой фракцией в мерной колбе, доводят объём раствора гексаном до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

Оптическую плотность исходного раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 278 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно гексана.

Содержание суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	A	–	оптическая плотность испытуемого раствора;
	а	–	навеска сырья, г;
	417	–	удельный показатель поглощения эвкалимина при длине волны 278 нм, ();
	W	–	влажность сырья,%.

Примечания

1. Содержание эфирного масла определяют в сырьё, предназначенном для получения водных, водно-спиртовых и спиртовых извлечений.

2. Содержание суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин определяют в сырьё, предназначенном для получения водно-спиртовых, спиртовых извлечений.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».