ФС.2.1.0083. Гидрокортизона ацетат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Гидрокортизона ацетат	ФС.2.1.0083
Гидрокортизон
Hydrocortisoni acetas	Взамен ФС.2.1.0083.18

 

C23H32O6	М.м. 404,50
[50-03-3]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(11β,17-Дигидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-ил)ацетат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % гидрокортизона ацетата C₂₃H₃₂O₆ в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 % и в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона ацетата (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл спирта 96 %, прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и кипятят в течение 1 мин; должен выделяться этилацетат, обнаруживаемый по запаху.

4. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной и встряхивают до полного растворения. В течение 5 минут должно появиться интенсивное коричнево-красное окрашивание с зелёной флуоресценцией. При добавлении 10 мл воды цвет раствора тускнеет, но флуоресценция не исчезает при просмотре в УФ-свете при 365 нм.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 218 до 222 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +158 до +167 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в диоксане; раствор готовят при нагревании до кипения, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 400:600.

Растворитель. Уксусная кислота—вода—метанол 1:10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца преднизолона ацетата (примесь C), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, D, E и G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 11β,17,21-тригидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [50-23-7].

Примесь B: 11β,17-дигидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [641-77-0].

Примесь C: (11β,17-дигидрокси-3,20-диоксопрегн-1,4-диен-21-ил)ацетат [52-21-1].

Примесь D: (17-гидрокси-3,11,20-триоксопрегн-4-ен-21-ил)ацетат [50-04-4].

Примесь E: [17-гидрокси-3,20-диоксопрегн-4,9(11)-диен-21-ил]ацетат [7753-60-8].

Примесь G: (17-гидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-11β,21-диил)диацетат [81968-66-3].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	4-кратное от времени удерживания основного пика.

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гидрокортизона ацетат – 1,0 (около 10 мин); примесь A – около 0,4; примесь B – около 0,7; примесь C – около 0,9; примесь D – около 1,2; примесь G – около 1,8; примесь E – около 2,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, D, E и G используют хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гидрокортизона ацетата для идентификации пиков содержащего примеси A, B, D, E и G. Для идентификации пика примеси C используют хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (R_S) между пиками гидрокортизона ацетата и примеси C должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика примеси C не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

— площадь пика примеси A не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

— площадь каждого пика примесей B, D и E не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

— площадь пика примеси G не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

— площадь каждого пика неидентифицированных примесей не должна превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

— суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 15 раз превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, приготовленного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидрокортизона ацетата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гидрокортизона ацетата и испытуемый раствор.

Содержание гидрокортизона ацетата C₂₃H₃₂O₆ в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество () вычисляют по формуле:

где		—	площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме испытуемого раствора;
		—	площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона ацетата;
	a1	—	навеска субстанции, мг;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата, мг;
	P	–	содержание гидрокортизона ацетата в фармакопейном стандартном образце гидрокортизона ацетата, %;
	W	–	потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.