ФС.2.1.0427. Кабозантиниба (S)-малат
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Кабозантиниба (S)-малат | ФС.2.1.0427 |
| Кабозантиниб | |
| Cabozantinibi (S)-malas | Вводится впервые |
|
|
|
| C28H24FN3O5·C4H6O5 |
М.м. 635,6 |
| [1140909-48-3] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
N-{4-[(6,7-Диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-Nʹ-(4-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид—(2S)-2-гидроксибутандиовая кислота (1:1).
Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % кабозантиниба (S)-малата C28H24FN3O5·C4H6O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
Кабозантиниба (S)-малат и его примеси являются высокотоксичными веществами. Необходимо принять меры для исключения возможности их вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
*Проявляет полиморфизм.
Растворимость. Растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика кабозантиниба на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата (раздел «Количественное определение»).
ИСПЫТАНИЯ
Родственные примеси
Растворы, содержащие кабозантиниба (S)-малата и его примеси, хранят в защищённом от света месте при температуре 5 °С.
Сумма примесей 2 и 3 – не более 0,0013 %.
1. Примеси 1 и 2. Примесь 1 – не более 0,0019 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Растворитель. Метанол—диметилсульфоксид 200:800.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.
Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2 растворяют в 20 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор В. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор Г. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор Д. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл калибровочного раствора Г и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор Е. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочный раствор Ж. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем до метки
Примечание
Примесь 1: 6,7-диметоксихинолин-4-ол [127285-54-5].
Примесь 2: 4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]анилин [190728-25-7].
Хроматографические условия
| Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %; |
| Температура колонки | 25 °С; |
| Температура образца | 5 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | масс-спектрометрический; |
| Объём пробы | 10 мкл; |
| Тип ионизации | электроспрей (ESI); |
| Режим электрораспыления | положительный (ESI+); |
| Рабочий режим | мониторинг множественных реакций (MRM); |
| Напряжение на капилляре | +3,5 кВ; |
| Напряжение на конусе | 80 В; |
| Температура источников ионов | 120 °С; |
| Температура испарения | 450 °С; |
| Расход газа-распылителя | 575 л/ч; |
| Расход газа в конусе | 70 л/ч; |
| Деление потока | 0,2 мл/мин. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–5 |
97 → 30 |
3 → 70 |
|
5–5,5 |
30 → 0 |
70 → 100 |
|
5,5–6,5 |
0 |
100 |
|
6,5–7 |
0 → 97 |
100 → 3 |
|
7–10 |
97 |
3 |
Переходы сканирования масс и энергии столкновений
|
Компонент |
Время удерживания |
Переходы сканирования масс, Да |
Энергия столкновений, эВ |
|
Примесь 1 |
около 3,0 мин |
206,00 ® 190,00 |
28 |
|
Примесь 2 |
около 4,9 мин |
297,00 ® 281,00 |
28 |
Хроматографируют калибровочные растворы А – Ж и испытуемый раствор.
Строят калибровочный график зависимости площадей пиков Si примесей 1 и 2 от концентрации примесей 1 и 2. Определяют параметры линейной регрессии.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1 0,0075 мкг/мл и примеси 2 0,005 мкг/мл отношение сигнал/шум (S/N) для пиков примесей 1 и 2 должно быть не менее 10.
На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1 0,1125 мкг/мл и примеси 2 0,075 мкг/мл относительное стандартное отклонение площади пиков примесей 1 и 2 должно быть не более 10,0 % (6 введений).
С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примесей 1 и 2 в испытуемом растворе (мкг/мл).
Содержание примесей 1 и 2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где |
C |
– | концентрация примесей 1 и 2 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл; |
|
a1 |
– | навеска субстанции, мг; | |
|
P |
– | содержание основного вещества в примесях 1 и 2 соответственно, %. |
2. Примесь 3. Не более – 0,0013 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Растворитель. Метанол—диметилсульфоксид 200:800.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 125 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор запрещается обрабатывать ультразвуком!
Раствор примеси 3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) 4-фторанилина (примесь 3 [371-40-4]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают раствор примеси 3 6,0 мл, 4,0 мл и 2,0 мл соответственно и доводят объём каждого раствора растворителем до метки.
Хроматографические условия
| Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %; |
| Температура колонки | 25 °С; |
| Температура образца | 5 °С; |
| Скорость потока | 1,2 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм; |
| Объём пробы | 10 мкл. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–8 |
95 → 55 |
5 → 45 |
|
8–15 |
55 → 45 |
45 → 55 |
|
15–20 |
45 → 0 |
55 → 100 |
|
20–21 |
0 |
100 |
|
21–23 |
0 → 95 |
100 → 5 |
|
23–28 |
95 |
5 |
Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 12 мин); примесь 3 – около 0,46.
Строят калибровочный график зависимости площади пика Si примеси 3 от концентрации примеси 3. Определяют параметры линейной регрессии.
Пригодность хроматографической системы. Относительное стандартное отклонение площади пика примеси 3 при концентрации 125 мкг/мл должно быть не более 20 % (6 введений).
С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 3 в испытуемом растворе (мкг/мл).
Содержание примеси 3 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где |
C |
– | концентрация примеси 3 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл; |
|
a1 |
– | навеска субстанции, мг; | |
|
P |
– | содержание основного вещества в примеси 3, %. |
3. Примесь 4. Не более – 0,0014 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода 3:300:700.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил 20:1000.
Растворитель. Растворяют 100 мг аскорбиновой кислоты в 500 мл воды, прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты и 500 мл ацетонитрила.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 45 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.
Раствор примеси 4. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) 4-аминофенола (примесь 4 [123-30-8]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 9,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают раствор примеси 4 5,0 мл, 10,0 мл и 15,0 мл соответственно и доводят объём каждого раствора растворителем до метки.
Хроматографические условия
| Колонка | 150 × 4,6 мм, сорбент комбинированный для ВЭЖХ; 5 мкм; |
| Температура колонки | 30 °С; |
| Температура образца | 5 °С; |
| Скорость потока | 1,5 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический (диодно-матричный), 192 нм; |
| Объём пробы | 100 мкл. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–6,5 |
100 |
0 |
|
6,5–6,6 |
100 → 5 |
0 → 95 |
|
6,6–25 |
5 |
95 |
|
25–25,1 |
5 → 100 |
95 → 0 |
|
25,1–33 |
100 |
0 |
Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 10 мин); примесь 4 – около 0,53.
Строят калибровочный график зависимости площади пика Si примеси 4 от концентрации примеси 4. Определяют параметры линейной регрессии.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией 0,0225 мкг/мл:
— отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 4 должно быть не менее 10;
— относительное стандартное отклонение площади пика примеси 4 должно быть не более 10,0 % (6 введений).
С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 4 в испытуемом растворе (мкг/мл).
Содержание примеси 4 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где |
C |
– | концентрация примеси 4 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл; |
|
a1 |
– | навеска субстанции, мг; | |
|
P |
– | содержание основного вещества в примеси 4, %. |
4. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях определения «Родственные примеси. Примесь 2» со следующими изменениями.
Растворитель. Вода—метанол—диметилсульфоксид 100:400:500.
Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 60 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки.
Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, прибавляют 60 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.
Примечание
Примесь 5: N-{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-Nʹ-(2-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид.
Примесь 6: 1-N,1- Nʹ-бис{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}циклопропан-1,1-дикарбоксамид [2439164-91-5].
Хроматографические условия
| Температура образца | 25 °С; |
| Объём пробы | 5 мкл. |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы и испытуемый раствор А.
Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 12 мин); примесь 6 – около 0,97; примесь 5 – около 1,03.
**Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кабозантиниба должно быть не менее 10.
Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 5–1,27; примесь 6–1,45.
Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):
— примесь 6 – не более 0,3 %;
— любая другая примесь – не более 0,15 %;
— сумма примесей – не более 1,0%.
Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).
Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,18 г (точная навеска) субстанции, в качестве растворителя, 3 мл диметилацетамида.
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.
Хроматографируют раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата и испытуемый раствор Б.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата:
— фактор асимметрии пика (AS) кабозантиниба должен быть не более 2,0;
— относительное стандартное отклонение площади пика кабозантиниба должно быть не более 2,0 % (6 введений).
Содержание кабозантиниба (S)-малата C28H24FN3O5·C4H6O5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
|
где |
S1 |
– | площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
S0 |
– | площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата ; | |
|
а1 |
– | навеска субстанции, мг; | |
|
а0 |
– | навеска фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, мг; | |
|
P |
– | содержание кабозантиниба (S)-малата в стандартном образце кабозантиниба (S)-малата, %; | |
|
W |
– | суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %. |
ХРАНЕНИЕ
В защищённом от света месте.
*Приводится для информации
**Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.