ФС.2.4.0019. Ланатозид Ц

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ланатозид Ц	ФС.2.4.0019
Ланатозид Ц
Lanatosidum C	Взамен ФС 42-2261-99

 

C49H76O20	М.м. 985,12
[17575-22-3]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

12b,14-Дигидрокси-3b-{[b-D-глюкопиранозил-(1®4)-3-O-ацетил-2,6-дидезокси-b-D-рибо-гексопиранозил-(1®4)-2,6-дидезокси-b-D-рибо-гексопиранозил-(1®4)-2,6-дидезокси-b-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5b-кард-20(22)-енолид.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % ланатозида Ц C₄₉H₇₆O₂₀ в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

*Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало и медленно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС«Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц.

2. ТСХ. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции ланатозида Ц на хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 1 мг субстанции в 1 мл спирта 96 %, прибавляют 1 мл натрия нитропруссида раствора 1 % и 0,1 мл натрия гидроксида раствора 10 %; должно появиться красное окрашивание, которое постепенно исчезает.

4. Качественная реакция

Железа(III) хлорида раствор 0,05 % в уксусной кислоте ледяной. Растворяют 5 мг железа(III) хлорида в 10 мл уксусной кислоты ледяной.

Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл железа(III) хлорида растворе 0,05 % в уксусной кислоте ледяной. Полученный раствор осторожно по стенке вливают в пробирку, содержащую 2 мл серной кислоты концентрированной; на границе двух слоёв должно появиться серовато-коричневое или тёмно-коричневое окрашивание; верхний слой постепенно должен окраситься в сине-зелёный или синий цвет.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +32 до +35 в пересчёте на сухое вещество (2 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Срок годности растворов, содержащих ланатозид Ц, не более 3 сут при хранении в плотно закрытой ёмкости в прохладном, защищённом от света месте.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Раствор трихлоруксусной кислоты. Растворяют 25 г трихлоруксусной кислоты в 100 мл спирта 96 %. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор хлорамина. Растворяют 0,3 г хлорамина в 10 мл воды. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—хлороформ 1:15:84.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (В). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (Г). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Реактив для детектирования. Раствор хлорамина—раствор трихлоруксусной кислоты 1:20. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (4 мкг), раствора стандартного образца ланатозида Ц (Б) (0,06 мкг), раствора стандартного образца ланатозида Ц (В) (0,04 мкг) и раствора стандартного образца ланатозида Ц (Г) (0,02 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и дважды хроматографируют восходящим способом. После первого хроматографирования пластинку подсушивают в течение 5 мин на воздухе и вновь хроматографируют в тех же условиях. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 115 °C в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (Г) должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции ланатозида Ц с R_f не менее 0,3 (R_st=1).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только трёх дополнительных зон адсорбции с R_st менее 1, каждая из которых по совокупности величины и интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции ланатозида Ц на хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (Б) (не более 1,5 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности флуоресценции их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора стандартного образца ланатозида Ц, содержащих 0,06 мкг, 0,04 мкг и 0,02 мкг ланатозида Ц, должно быть не более 3,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 7,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 100 °С и остаточном давлении не более 8 кПа.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Пикриновой кислоты щелочной раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл пикриновой кислоты раствора 1 %, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 5 % и доводят объём раствора водой до метки. Раствор хранят в защищённом от света месте не более 2 сут.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 15,0 мл пикриновой кислоты щелочного раствора, перемешивают и выдерживают в защищённом от света месте при комнатной температуре в течение 20 мин.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, растворяют в спирте 96 %  доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 15,0 мл пикриновой кислоты щелочного раствора, перемешивают и выдерживают в защищённом от света месте при комнатной температуре в течение 20 мин.

Раствор сравнения. Спирт 96 %—щелочной раствор пикриновой кислоты 10:15.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца ланатозида Ц на спектрофотометре при длине волны 484 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание ланатозида Ц C₄₉H₇₆O₂₀ в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где	A1	–	оптическая плотность испытуемого раствора;
	A0	–	оптическая плотность раствора стандартного образца ланатозида Ц;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	a0	–	навеска фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, мг;
	P	–	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце ланатозида Ц, %;
	W	–	потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.