ФС.2.1.0032. Рифампицин
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Рифампицин | ФС.2.1.0032 |
Рифампицин | |
Rifampicinum | Взамен ФС.2.1.0032.15 |
|
|
C43Н58N4O12 |
М.м. 822,94 |
[13292-46-1] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
[(2S,12Z,14E,16S,17S,18R,19R,20R,21S,22R,23S,24E)-5,6,9,17,19-Пентагидрокси-2,4,12,16,18,20,22-гептаметил-8-[N-(4-метилпиперазин-1-ил)метанимидоил]-23-метокси-1,11-диоксо-1,2-дигидро-2,7-(эпоксипентадека[1,11,13]триеназано)нафто[2,1-b]фуран-21-ил]ацетат.
Рифампицин – полусинтетический антибиотик, получаемый из рифамицина SV.
Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % рифампицина C43Н58N4O12 в пересчёте на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Красно-коричневый или коричнево-красный кристаллический порошок.
Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в ацетоне, спирте 96 % и воде.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца рифампицина.
2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Cпектр поглощения раствора субстанции, приготовленного для количественного определения, в области длин волн от 220 до 500 нм должен иметь максимумы при 237, 254, 334 и 475 нм. Отношение оптической плотности при 334 нм к оптической плотности при 475 нм должно быть около 1,75.
ИСПЫТАНИЯ
рН. От 4,5 до 6,5 (1 % суспензия субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Раствор для приготовления подвижной фазы. Растворяют 1,9 г натрия перхлората в 200 мл воды, прибавляют 1 мл фосфорной кислоты концентрированной, 5,9 г лимонной кислоты, 20,9 г калия фосфата однозамещённого, доводят водой до 1000 мл.
Подвижная фаза. Ацетонитрил—раствор для приготовления подвижной фазы 350:650.
Смесь растворителей. К 10 объёмам 21,01 % раствора лимонной кислоты прибавляют 23 объёма 13,61 % раствора калия фосфата однозамещённого, 77 объёмов 17,42 % раствора калия фосфата двузамещённого, 250 объёмов ацетонитрила и 640 объёмов воды.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.
Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг стандартного образца рифампицина хинона, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.
Примечание
Рифампицина хинон: ([(2S,12Z,14E,16S,17S,18R,19R,20R,21S,22R,23S,24E)-5,17,19-Тригидрокси-2,4,12,16,18,20,22-гептаметил-8-[N-(4-метилпиперазин-1-ил)метанимидоил]-23-метокси-1,6,9,11-тетраоксо-1,2,6,9-тетрагидро-2,7-(эпоксипентадека[1,11,13]триеназано)нафто[2,1-b]фуран-21-ил]ацетат [13983-13-6].
Хроматографические условия
Колонка | 120 × 4,6 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
Объём пробы | 20 мкл; |
Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания основного пика. |
Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (R) между пиками рифампицина и рифампицина хинона должно быть не менее 4,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
— площадь пика рифампицина хинона должна быть не более 1,5-кратной площади пика рифампицина хинона на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,5 %);
— площадь любого пика, кроме пиков рифампицина и рифампицина хинона, должна быть не более площади пика рифампицина на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0 %);
— суммарная площадь пиков всех примесей, кроме пика рифампицина хинона, не должна более чем в 3,5 раза превышать площадь пика рифампицина на хроматограмме стандартного раствора (не более 3,5 %).
Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции, сушат при температуре 80 °С и остаточном давлении не более 0,67 кПа в течение 4 ч.
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы»). Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
*Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 10 мг субстанции в 0,5 мл 1 % раствора желатина на мышь, внутрь. Срок наблюдения 48 ч.
Для субстанций, предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального введения, испытание проводится следующим образом.
Тест-доза – 4 мг субстанции в 0,5 мл приготовленного раствора на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.
Испытуемый раствор. Помещают 300 мг (точная навеска) субстанции в стерильную ступку, растирают. В мерную колбу вместимостью 15 мл помещают 30 мг аскорбиновой кислоты и 6 мг натрия сульфита, доводят объём раствора водой для инъекций до метки и перемешивают. Полученный раствор при постоянном перемешивании прибавляют к навеске субстанции, а затем по каплям прибавляют натрия гидроксида раствор 2 М (около 50 – 200 мкл) до полного растворения субстанции (рН 8 – 10). Концентрация рифампицина в полученном растворе – 20 мг в 1 мл. К 2 мл полученного раствора прибавляют 3 мл воды для инъекций для приготовления испытуемого раствора с концентрацией рифампицина 8 мг в 1 мл.
*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг рифампицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % c концентрацией 5 мг/мл, а затем разводят его водой для ЛАЛ-теста не менее чем в 40 раз.
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют фосфатный буферный раствор рН 7,4 и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,4 до метки.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 475 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют фосфатный буферный раствор рН 7,4.
Содержание рифампицина С43Н58N4O12 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:
где |
A |
– |
оптическая плотность испытуемого раствора; |
a |
– | навеска субстанции, г; | |
187 |
– | удельный показатель поглощения рифампицина при длине волны 475 нм (); | |
W |
– | потеря в массе при высушивании, %. |
ХРАНЕНИЕ
В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при температуре не выше 25 °С.
*Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.