ФС.2.1.0061. Ацетилцистеин

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ацетилцистеин	ФС.2.1.0061
Ацетилцистеин
Acetylcysteinum	Взамен ФС.2.1.0061.18

 

C5H9NO3S	М.м. 163,19
[616-91-1]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2R)-2-Ацетамидо-3-сульфанилпропановая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % ацетилцистеина C₅H₉NO₃S в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы со специфическим запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия. ( ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетилцистеина.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1,0  мл воды, прибавляют 0,1 мл натрия нитропруссида раствора 5 % и 0,1 мл раствора аммиака концентрированного 32 %; должно появиться тёмно-фиолетовое окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 104 до 110 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Удельное вращение. От +21 до +27 в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. К 1,25 г (точная навеска) субстанции прибавляют 1 мл раствора натрия эдетата 0,01 г/мл и 7,5 мл 1 М раствора натрия гидроксида, перемешивают до растворения и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,0 до 25,0 мл.

рН раствора. От 2,0 до 2,8 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления.

Подвижная фаза (ПФ) Ацетонитрил—вода 3:97, доводят значение pH фосфорной кислотой до рН 3,0.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 80 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1,0 мл хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг примеси А, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор B. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг примеси В, 5 мг примеси С и 2,5 мг примеси D, прибавляют 4,0 мл раствора примеси А, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Стандартный раствор C. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг 2-метил-2-тиазолин-4-карбоксилат натрия [15058-19-2], растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки.

Примечание

Примесь A (L-цистин): 3,3′-дисульфандиилбис[(2R)-2-аминопропановая кислота] [56-89-3].

Примесь B (L-цистеин): (2R)-2-амино-3-сульфанилпропановая кислота [52-90-4].

Примесь C (N, N’ -диацетил-L-цистин): 3,3′-дисульфандиилбис[(2R)-2-ацетамидопропановая кислота] [5545-17-5].

Примесь D (N, S -диацетил-L-цистеин): (2R)-2-ацетамидо-3-(ацетилсульфанил)пропановая кислота [18725-37-6].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,0 мм силикагель октадецилсилильный, эндкепированная, 5 мкм;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика ацетилцистеина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартные растворы A, B и C, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетилцистеин – 1 (около 5 мин); примесь А – около 0,48; примесь B – около 0,53; 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновая кислота – около 0,8 примесь C – около 2,1; примесь D – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют хроматограмму стандартного раствора В; хроматограмму стандартного раствора С используют для идентификации пика примеси 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновой кислоты.

Пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:  отношение сигнал/шум (S/N) для пика ацетилцистеина должно быть не менее 10.

На хроматорамме стандартного раствора В:

— разрешение (R_S) между пиками примесей A и B должно быть не менее 1,5;

— отношение максимум/минимум (p/v) между пиками 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновая кислоты  и ацетилцистеина  должно быть не менее 5;

— фактор асимметрии пика (A_S) ацетилцистеина, должен быть не более 2,2.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 3,4; примесь C – 0,7; примесь D – 0,3.

Допустимое содержание примесей:

— примесь С – не более 0,3 %;

— примесь B – не более 0,2 %;

— примесь D – не более 0,15 %;

— любая другая примесь – не более 0,10 %;

— сумма примесей – не более 0,5 %.

Содержание любой примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

 ,

где	Si	–	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика ацетилцистеина на хроматограмме раствора сравнения;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	a0	–	навеска стандартного образца примеси, мг;
		–	поправочный коэффициент.

Не учитывают пик примеси 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновой кислоты, который образуется в результате разложения ацетилцистеина в кислых растворах, таких как раствор хлористоводородной кислоты 1 М и пики, площадь которых менее площади пика ацетилцистеина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 70 °С в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола») с использованием эталонного раствора 1.

Цинк. Не более 0,001 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в 0,001 М хлористоводородной кислоте и доводят объём тем же растворителем до метки.

Калибровочные растворы. Готовят разведения с использованием стандартного раствора цинка 5 мг/мл и 0,001 М хлористоводородной кислоты.

Источник излучения	Цинковая лампа с полым катодом;
Длина волны	213,8 нм;
Атомизация	Воздушно-ацетиленовое пламя.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. Учитывают величину неспецифической абсорбции. По калибровочной прямой рассчитывают концентрацию цинка в субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии c ОФС «Остаточные органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии c ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и перемешивают. После охлаждения на ледяной бане прибавляют 10 мл калия йодида раствора 1 М и титруют 0,05 М раствором йода (индикатор – крахмала раствор 1 %).

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 16,32 мг C₅H₉NO₃S.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

 

*Контроль по показателю «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.