ФС.2.5.0012. Душицы обыкновенной трава

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 г. N 120

Дата введения в действие: c 13.03.2024 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Душицы обыкновенной трава	ФС.2.5.0012
Origani vulgaris herba	Взамен ФС.2.5.0012.15

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Cобранная во время цветения, высушенная трава многолетнего культивируемого и дикорастущего травянистого растения душицы обыкновенной – Origanum vulgare L., сем. яснотковых – Lamiaceae. Содержит:

— цельное сырьё:не менее 0,1 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

— измельчённое сырьё:не менее 0,08 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

— не менее 0,8 % суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые цветоносные, олиственные стебли длиной до 20 см. Листья супротивные, черешковые, продолговато-яйцевидные, к верхушке заострённые, мелкозубчатые или почти цельнокрайние длиной 2–4 см, с белёсыми волосками, расположенными, в основном, по жилкам, и коричневатыми блестящими точками (погружённые желёзки), главным образом, с нижней стороны. Стебли четырёхгранные, опушённые или почти голые, вверху разветвлённые. Соцветия щитковидно-метельчатые на концах ветвей, раскидистые, многоцветковые, состоят из компактных или удлинённо-колосовидных полумутовок, на цветоносах видны блестящие мелкие округлые желёзки. Прицветники длиннее чашечки, продолговатые или яйцевидные, острые, без желёзок. Чашечка с треугольно-ланцетовидными зубцами, снаружи с редкими волосками, блестящими округлыми желёзками и торчащими из зева белёсыми волосками, которые растут с внутренней стороны чашечки по линии вдоль оснований зубцов. Цветки длиной 3–5 мм, венчик двугубый, слегка опушённый. Семена мелкие, длиной около 1 мм, округлые с заостренным кончиком.

Цвет листьев сверху – зелёный, иногда с фиолетовым оттенком, снизу — светло-зелёный; стеблей — зелёный, коричневато-зелёный, редко — светло-коричневый, как правило, с фиолетовым оттенком; цвет прицветников — зеленовато-фиолетовый, чашечки — зеленовато-фиолетовый или фиолетовый; венчика — коричневато-розовый, реже коричневый; семян — коричневый или светло-коричневый. Запах характерный.

Измельчённое сырьё. Кусочки стеблей, часто продольно-расщеплённых, листьев, а также отдельные цветки и семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10× и др.) видны кусочки стеблей зелёных, коричневато-зелёных или светло-коричневых, часто с фиолетовым оттенком, нередко продольно-расщеплённых с беловатой губчатой сердцевиной; кусочки зелёных листьев с блестящими коричневатыми точками (погружённые желёзки) и белёсыми волосками; цельные зеленовато-фиолетовые или фиолетовые чашечки или их кусочки с желёзками и редкими волосками снаружи и длинными белёсыми волосками на уровне зубцов с внутренней стороны; кусочки коричневого или коричневато-розового венчика с белёсыми волосками; мелкие округлые коричневые или светло-коричневые семена.

Цвет измельчённого сырья зелёный, серовато-зелёный с белыми, коричневыми, фиолетовыми, коричневато-фиолетовыми, беловато-зелёными и розовыми вкраплениями. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса верхней стороны листа со слабоизвилистыми стенками, нижней стороны листа — с более извилистыми стенками; стенки клеток нередко четковидно-утолщённые. Устьица на обеих сторонах листа окружены 2клетками эпидермиса, смежные стенки которых расположены перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Волоски 2 типов (простые и головчатые) расположены по всей пластинке листа, в большем количестве – на нижней его стороне. Простые волоски, главным образом, многоклеточные, с бородавчатой поверхностью и утолщёнными стенками (у крупных волосков часто одна или более клеток спавшиеся); головчатые волоски на одноклеточной ножке с овальной одноклеточной головкой. Округлые эфирномасличные желёзки, у которых можно иногда видеть 8 радиально расположенных выделительных клеток, преобладают на нижней стороне листа и находятся в углублении ниже уровня эпидермиса (погружённые), у места прикрепления желёзки эпидермальные клетки образуют розетку, как правило, из 10–16 клеток. Клетки эпидермиса стебля почти многоугольные, вытянутые, волоски и устьица характерного строения, желёзки мелкие, редко встречаются ветвистые многоклеточные волоски. Эпидермис наружной поверхности чашечки с редкими устьицами, многочисленными простыми 2–3-клеточными волосками и крупными желёзками; с внутренней стороны чашечки клетки эпидермиса сильноизвилистые с хорошо заметной складчатостью кутикулы, по всей поверхности – мелкие головчатые волоски, по линии вдоль оснований зубцов расположены длинные многоклеточные волоски с бородавчатой кутикулой; в нижней части чашечки видны сосудистые пучки, окружённые пористыми толстостенными одревесневшими склеренхимными волокнами. Клетки эпидермиса венчика с наружной стороны извилистые, на лопастях видны многоклеточные волоски и редкие непогружённые желёзки; с внутренней стороны лопасти покрыты сосочковидными выростами, среди которых иногда встречаются пальцевидные волоски со штриховатой кутикулой, в средней трети венчика эти волоски многочисленные. В покровной ткани пыльников видны клетки с лучистым утолщением стенок; пыльцевые зёрна – сферические, со слегка бородавчатой экзиной и 6 порами.

Рисунок 1 – Душицыобыкновеннойтрава

1– фрагмент чашечки с наружной стороны: а –многоклеточные волоски, просвечивающиеся с внутренней стороны зева, б – многоклеточный волосок с наружной стороны, в – желёзка, г – склеренхимные одревесневшие волокна (40×); 2– фрагмент эпидермиса верхней стороны листа: а – желёзка, б – головчатый волосок, в – устьица диацитного типа (200×);3– фрагмент эпидермиса нижней стороны листа: а – многоклеточный волосок, б – головчатый волосок, в – желёзка, г – устьица диацитного типа (200×); 4– фрагмент эпидермиса прицветного листа: а – многоклеточный волосок, б– головчатый волосок (200×); 5– фрагмент чашечки с наружной стороны: а – многоклеточный волосок, б – непогружённая желёзка (200×);6– фрагмент эпидермиса листа: а – устьица диацитного типа, б – желёзка с розеткой клеток вокруг, в – простой волосок фрагмента эпидермиса прицветного листа (200×); 7– фрагмент пыльника: а –сферическая пыльца с шестью порами, б – клетки с лучистым утолщением стенок (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода––муравьиная кислота безводная––этилацетат––толуол 2:5:20:10.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл спирта 96 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение10 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор рутина. Растворяют 0,001 г рутина в10 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 20 мкл испытуемого раствора и раствора рутина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90  % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку нагреваютпри температуре 100–105 °С в течение 2–3 мин, еще тёплую обрабатывают последовательно реактивом для детектирования 1, затем реактивом для детектирования 2 и через 30 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат

На хроматограмме раствора рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-оранжевого или оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-оранжевого цвета выше зоны адсорбции рутина(флавоноиды); над ней зона адсорбции синего или фиолетово-синего цвета, еще выше зона адсорбции ярко-голубого или голубого цвета со слабым светло-зелёным оттенком, над ней зона голубовато-синего цвета (фенолкарбоновые кислоты); допускается обнаружение других зон адсорбции.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая.Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте.Не более 5,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее).Не более 7 %.

Кусочки стеблей и боковых веточек, в том числе отделённые при анализе. Не более 40 %.

Органическая примесь. Не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 2, из 25,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, время перегонки 2 ч).

Сумма флавоноидов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250мл помещают 0,80 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50,0 мл спирта 60 % и взвешивают с погрешностью ± 0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1,5 ч. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят спиртом 60 % до первоначальной массы. Извлечения фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 25мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают1,0 мл исходного раствора, прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца лютеолина.В мерную колбу вместимостью 50 млпомещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лютеолина, прибавляют 25 мл спирта 96 % и нагревают на водяной бане. Затем раствор охлаждают, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца лютеолина.В мерную колбу вместимостью 25 млпомещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца лютеолина,прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца лютеолина.В мерную колбу вместимостью 25 млпомещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца лютеолина,прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения.В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают1,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 минна спектрофотометре при длине волны 400нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца лютеолина в аналогичных условиях относительно раствора сравнения стандартного образца лютеолина.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин в сухом сырье в процентах(Х) вычисляют по формуле:

где	A	–	оптическая плотность испытуемогораствора;
	Aо	–	оптическая плотность раствора стандартного образца лютеолина;
	a	–	навеска сырья, г;
	а0	–	навеска фармакопейногостандартного образцалютеолина, г;
	P	–	содержание основного вещества в фармакопейномстандартном образцелютеолина, %;
	W	–	влажностьсырья, %.

Допускается содержаниесуммы флавоноидов в пересчёте на лютеолинвычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом по формуле:

где	A	—	оптическая плотность испытуемого раствора;
	а	—	навеска сырья, г;
	549	—	удельный показатель поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридомпри длине волны 400нм ();
	W	—	влажность сырья, %.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».