ФС.2.1.0081. Гемцитабина гидрохлорид

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Гемцитабина гидрохлорид	ФС.2.1.0081
Гемцитабин
Gemcitabini hydrochloridum	Взамен ФС.2.1.0081.18

 

C9H11F2N3O4·HCl	М.м. 299,66
[122111-03-9]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-Амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор-β-D-эритро-пентофуранозил)пиримидин-2(1H)-она гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % гемцитабина гидрохлорида C₉H₁₁F₂N₃O₄·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в ацетоне.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гемцитабина на хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +43,0 до +50,0 в пересчёте на сухое вещество (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности )жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном ВY₇ (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

pH. От 2,0 до 3,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). 0,1 М фосфатный буферный раствор рН 2,5.

Подвижная фаза В (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Во флакон (колбу) вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг субстанции, прибавляют 4 мл калия гидроксида раствора в метаноле 3 М и обрабатывают на ультразвуковой бане в течение 5 мин. Флакон закрывают и нагревают при 55 0С не менее 6 ч для получения примеси В. После охлаждения переносят содержимое флакона в мерную колбу вместимостью 100 мл, последовательно промывая флакон раствором фосфорной кислоты 1 %. Доводят объём раствора в мерной колбе тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А (цитозин): 4-аминопиримидин-2(1H)-он [71-30-7].

Примесь В (гемцитабина α-аномер): 4-амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор-α-D-эритро-пентофуранозил)пиримидин-2(1H)-он [95058-85-8].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,2 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 275 нм;
Объём пробы	50 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–8	97	3
8–13	97 → 50	3 → 50
13–20	50	50
20–25	50 → 97	50 →3
25–30	97	3

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гемцитабин – 1 (около 8 мин); примесь А – около 0,4; примесь B – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

— разрешение (R_S) между пиками примеси B и гемцитабина должно быть не менее 8,0.

На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площади пика гемцитабина и примеси A должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей A, B в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика каждой из примесей A, B на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика каждой из примесей A, B на хроматограмме стандартного раствора;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	a0	–	навеска фармакопейного стандартного образца каждой из примесей A, B мг;
	P	–	содержание примеси A, B в фармакопейном стандартном образце примеси A, B, соответственно, %.

Содержание любой примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика гемцитабина на хроматограмме стандартного раствора;
	a1	–	навеска субстанции, мг;
	a0	–	навеска фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг;
	P	–	содержание гемцитабина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце гемцитабина гидрохлорида, %.

Допустимое содержание примесей:

— примеси А, В — не более 0,1 % каждая;

— любая другая примесь – не более 0,1 %;

— сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг гемцитабина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гемцитабина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

— разрешение (R_S) между пиками примеси B и гемцитабина должно быть не менее 8,0;

— фактор ассиметрии пика (A_S) гемцитабина должен быть не более 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида:

— относительное стандартное отклонение площади пика гемцитабина должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание гемцитабина гидрохлорида C₉H₁₁F₂N₃O₄·HCl в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида;
	а1	–	навеска субстанции, мг;
	а0	–	навеска фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг;
	W	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	P	–	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце гемцитабина гидрохлорида, %.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.