ФС.2.1.0132. Метилтиониния хлорид
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Метилтиониния хлорид | ФС.2.1.0132 |
| Метилтиониния хлорид | |
| Methylthioninii chloridum | Взамен ФС.2.1.0132.18 |
|
|
|
| C16H18ClN3S·nH2O |
М.м. 319,85 (безводный) |
| [122965-43-9] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
3,7-Бис(диметиламино)-5λ4-фенотиазин-5-ий хлорид гидрат.
Содержит не менее 93,0 % и не более 102,0 % метилтиониния хлорида C16H18ClN3S в пересчёте на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Тёмно—зелёный или тёмно-синий кристаллический порошок или от тёмно-зелёного до тёмно-синего цвета с металлическим отблеском кристаллы. Водные растворы субстанции синего цвета.
*Гигроскопичен.
Растворимость. Мало растворим в воде и спирте 96 %.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Проводят определения 1 и 3–5 или 2–5.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метилтиониния хлорида.
2. Спектрофотометрия (ОФС«Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 % до метки.
Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 800 нм должен иметь максимумы при 255–260 нм, 285–290 нм, 670–680 нм и 740–750 нм.
3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика метилтиониния на хроматограмме раствора стандартного образца метилтиониния хлорида (раздел «Родственные примеси)».
4. Качественная реакция. Растворяют кристаллик субстанции в серной кислоте разведённой 16 %. При прибавлении небольшими порциями цинковой пыли раствор должен обесцветиться; профильтрованная жидкость при стоянии на воздухе или при прибавлении водорода пероксида раствора разведённого должна вновь приобрести синюю окраску.
5. Качественная реакция. Прокаливают 50 мг субстанции с 0,5 г натрия карбоната безводного. Остаток охлаждают, растворяют в 10 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и фильтруют. Фильтрат без дальнейшего добавления азотной кислоты должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусная кислота 0,1 % (о/о).
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Смесь растворителей. Ацетонитрил—ПФА 300:700.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси растворителей, выдерживая на ультразвуковой бане в течение 5 мин, и доводят объём раствора смесью растворителей метки.
Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём смесью растворителей до метки.
Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метилтиониния для проверки пригодности системы, содержащего примесь А, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.
Примечание
Примесь А: 3-(диметиламино)-3-(метиламино)-5λ4-фенотиазин-5-ий хлорид [531-55-5].
Хроматографические условия
| Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный с этиленовыми мостиками, гибридный,
эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
| Температура колонки | 30 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 246 нм; |
| Объём пробы | 5 мкл. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–5 |
80 |
20 |
|
5–25 |
80 → 30 |
20 → 70 |
|
25–32 |
30 |
70 |
|
32–35 |
30 → 80 |
70 → 20 |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, растворы сравнения А и Б и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Метилтиониний – 1 (около 11 мин); примесь А – около 0,8.
Идентификация примесей. Для идентификации примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу метилтиониния для проверки пригодности хроматографической системы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси А и метилтиониния должно быть не менее 3,5.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
— площадь пика примеси А не должна превышать 5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 5,0 %);
— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);
— сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси А, не должна превышать 5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %).
Не учитывают пики с площадью менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).
Металлы. Определение проводят методом АЭС (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия») в аргоновой плазме с использованием стандартной оптической системы или масс-спектрометра (кроме определения железа и хрома); в последнем случае в качестве внутреннего стандарта используют индий.
Растворитель. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 4,0 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор индия 10 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора индия для атомной спектрометрии 1 мг/мл и доводят объём раствора растворителем до метки.
Стандартный раствор 1 мкг/мл. В мерные колбы вместимостью по 50 мл помещают по 1,0 мл стандартного раствора каждого определяемого металла для атомной спектрометрии с концентрацией 1,0 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют при перемешивании в 9 мл воды, прибавляют 0,1 мл раствора индия 10 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл стандартного раствора 1 мкг/мл, прибавляют 1,0 мл раствора индия 10 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.
Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора индия 10 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.
Условия определения
|
Элемент |
Оптическая детекция |
Детекция по массе |
||
|
сигнал, нм |
фон 1, нм |
фон 2, нм |
изотоп |
|
|
396,15 |
396,05 |
396,25 |
27 |
|
|
238,20 |
238,27 |
238,14 |
– |
|
|
214,44 |
214,37 |
214,51 |
114 |
|
|
260,57 |
260,50 |
260,64 |
55 |
|
|
327,40 |
327,31 |
327,48 |
65 |
|
|
202,03 |
202,02 |
202,04 |
95 |
|
|
231,60 |
231,54 |
231,66 |
60 |
|
|
190,00 |
189,90 |
190,10 |
118 |
|
|
253,70 |
253,60 |
253,80 |
200 |
|
|
217,00 |
216,90 |
217,10 |
208 |
|
|
283,56 |
283,49 |
283,64 |
– |
|
|
213,86 |
213,80 |
213,91 |
66 |
|
|
Индий |
– |
– |
– |
115 |
Примечания
1. Для определения ртути необходим прибор с приставкой для генерации гидридов.
2. Определение олова и свинца методом стандартной оптической спектрометрии находится на границе чувствительности.
Допустимое содержание примесей
|
Элемент |
Максимальное содержание, ppm |
|
100 |
|
|
200 |
|
|
1 |
|
|
10 |
|
|
300 |
|
|
10 |
|
|
10 |
|
|
10 |
|
|
1 |
|
|
10 |
|
|
100 |
|
|
100 |
Потеря в массе при высушивании. Не менее 8,0 и не более 24,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,25 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
**Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг субстанции метилтиониния хлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.
Раствор стандартного образца метилтиониния хлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца метилтиониния хлорида, растворяют в смеси растворителей и доводят объём той же смесью до метки.
Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца метилтиониния хлорида.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца метилтиониния хлорида фактор асимметрии пика (AS) метилтиониния должен быть не более 3,0.
Содержание метилтиониния хлорида C16H18ClN3S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
|
где |
S1 |
– | площадь пика метилтиониния на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
S0 |
– | площадь пика метилтиониния на хроматограмме раствора стандартного образца метилтиониния хлорида; | |
|
а1 |
– | навеска субстанции, мг; | |
|
а0 |
– | навеска фармакопейного стандартного образца метилтиониния хлорида, мг; | |
|
P |
– | содержание метилтиониния хлорида в фармакопейном стандартном образце метилтиониния хлорида, %; | |
|
W |
– | потеря в массе при высушивании, %. |
ХРАНЕНИЕ
В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.
*Приводится для информации.
**Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.