ФС.2.1.0542. Осельтамивира фосфат
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Осельтамивира фосфат | ФС.2.1.0542 |
| Осельтамивир | |
| Oseltamiviri phosphas | Вводится впервые |
|
|
|
| C16H28N2O4·H3PO4 |
М.м. 410,40 |
| [204255-11-8] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Этил[(3R,4R,5S)-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоксилата] фосфат (1:1).
Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % осельтамивира фосфата C16H28N2O4·H3PO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.
*Проявляет полиморфизм.
Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата.
Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика осельтамивира на хроматограмме раствора стандартного образца осельтамивира фосфата (раздел «Количественное определение»).
3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Удельное вращение. От –30,7 до –32,6 в пересчёте на сухое вещество (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).
Родственные примеси
Примесь В. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,54 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Раствор аммония ацетата—ацетонитрил—вода для хроматографии 100:300:600.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в 5 мл этанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата, не содержащего примесь В, растворяют в растворе стандартного образца примеси В и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора водой до метки.
Примечание
Примесь В: этил{(1R,2R,3R,4R,5S)-2-азидо-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогексан-1-карбоксилат}.
Хроматографические условия
| Колонка | 50 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 40 °С; |
| Скорость потока | 0,5 мл/мин (без деления потока); |
| Примечание – Возможно использование скорости потока до 1,5 мл/мин при применении деления потока; | |
| Детектор | масс-спектрометрический; |
| Объём пробы | 1 мкл; |
| Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика осельтамивира фосфата. |
Условия детектирования
Приводимые значения параметров являются рекомендуемыми и при необходимости могут быть изменены при условии выполнения критериев пригодности системы.
| Источник ионизации | электроспрей (ESI); |
| Режим ионизации | положительный (ESI+); |
| Режим детектирования | мониторинг избранного иона (SIM); |
| Величина m/z для детектируемого иона | 356,2; |
| Напряжение на капилляре | 3 кВ; |
| Время выдержки | 580 мс; |
| Напряжение на фрагментаторе | 120 В; |
| Температура газа | 350 °С; |
| Расход газа-осушителя | 13 л/мин; |
| Давление небулайзера | 345 кПа. |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси В.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси В должно быть не менее 10,0.
Содержание примеси В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
|
где |
S1 |
– |
площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
S0 |
– | площадь пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения; | |
|
а1 |
– | навеска субстанции, мг; | |
|
а0 |
– |
навеска стандартного образца примеси В, мг; |
|
|
P |
– | содержание примеси В в стандартном образце примеси В, %. |
Допустимое содержание примесей:
— примесь В – не более 0,01 %.
Примесь Н. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).
*Гигроскопична.
Силулирующий реагент. Хлортриметилсилан—гексаметилдисилазан—пиридин безводный 1:2:10.
Испытуемый раствор. К 0,15 г субстанции прибавляют 10,0 мл силулирующего реагента, перемешивают, нагревают при температуре 60 °С в течение 20 мин и центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин.
Стандартный раствор. Растворяют 15 мг (точная навеска) стандартного образца примеси Н в 1 мл пиридина безводного. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мкл полученного раствора, прибавляют 10 мкл испытуемого раствора и доводят объём раствора пиридином безводным до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл стандартного раствора и доводят объём раствора пиридином безводным до метки.
Примечание
Примесь H: трибутил-λ5-фосфанон [814-29-9].
Хроматографические условия
| Колонка | капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая поли(диметил)силоксаном, 0,25 мкм; |
| Детектор | пламенно-ионизационный; |
| Расход: газа-носителя (азот) | 1,2 мл/мин; |
| Деление потока | 1:50; |
| Объём пробы | 1 мкл; |
| Время хроматографирования | 21 мин. |
Температурная программа
|
|
Время, мин |
Температура, °C |
|
Колонка |
0–2 |
180 |
|
|
2–11 |
180 → 250 |
|
|
11–21 |
250 |
|
Инжектор |
|
260 |
|
Детектор |
|
260 |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Осельтамивир – 1 (около 10 мин); примесь Н – около 0,5.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси H используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси Н должно быть не менее 10,0.
На хроматограмме стандартного раствора фактор асимметрии пика (AS) примеси Н должен быть не более 2,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Н не должна превышать 1,5 площади пика примеси Н на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15 %).
Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН калия гидроксида раствором 1 М до 6,0, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 135:245:620.
Растворитель. Ацетонитрил—метанол—вода 135:245:620.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.
Примечание
Примесь А: (3R,4R,5S)-4-амино-5-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоновая кислота [1364932-19-3].
Примесь С: (3R,4R,5S)-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоновая кислота [187227-45-8].
Хроматографические условия
| Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 50 °С; |
| Скорость потока | 1,2 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 207 нм; |
| Объём пробы | 20 мкл; |
| Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика осельтамивира. |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Осельтамивир – 1 (около 17 мин); примесь А – около 0,17; примесь С – около 0,18.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и C используют относительное время удерживания и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика осельтамивира должно быть не менее 10.
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси C должно быть не менее 1,5.
Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножают на поправочный коэффициент 0,71.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
— площадь пика примеси С не должна превышать трёхкратную площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);
— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);
— сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать семикратную площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,7 %).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).
Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б)в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.
Раствор стандартного образца осельтамивира фосфата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата, не содержащего примесь В, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.
Хроматографируют раствор стандартного образца осельтамивира фосфата и испытуемый раствор.
Содержание осельтамивира фосфата C16H28N2O4·H3PO4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:
|
|
|
|
|||
| где |
S1 |
– |
площадь пика осельтамивира на хроматограмме испытуемого раствора; |
||
|
S0 |
– | площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора стандартного образца осельтамивира фосфата; | |||
|
а1 |
– | навеска субстанции, мг; | |||
|
а0 |
– |
навеска стандартного образца осельтамивира фосфата, не содержащего примесь В, мг; |
|||
|
P |
– | содержание осельтамивира фосфата в стандартном образце осельтамивира фосфата, не содержащем примесь В %; | |||
|
W |
– | суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %. | |||
ХРАНЕНИЕ
В сухом, защищённом от света месте.
*Приводится для информации.