ФС.2.1.0313. Цефокситин натрия
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Цефокситин натрия | ФС.2.1.0313 |
| Цефокситин | |
| Cefoxitinum natricum | Вводится впервые |
|
|
|
| C16H16N3NaO7S2 |
М.м. 449,43 |
| [33564-30-6] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
(6R,7S)-3-[(Карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.
Содержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % цефокситина натрия C16H16N3NaO7S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый порошок.
*Гигроскопичен.
Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефокситина натрия.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефокситина на хроматограмме раствора стандартного образца цефокситина натрия (раздел «Количественное определение»).
3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А или Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Удельное вращение. От +206 до +214 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
рН раствора. От 4,2 до 7,0 (10 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Растворы используют свежеприготовленными.
Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г калия дигидрофосфата и 1,8 г динатрия гидрофосфата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 100,0 мл полученного раствора, прибавляют 800 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 7,00±0,05, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г аммония формиата, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора муравьиной кислотой безводной до 2,70±0,05, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки.
Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора буферным раствором до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца цефокситина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, E, F, H, I, J и K, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Примечание
Примесь A: (6R,7S)-3-(гидроксиметил)-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, [54333-94-7].
Примесь B: (2RS,6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-3-ен-2-карбоновая кислота.
Примесь E: (6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[(2R)-2-метокси-2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [2395025-32-6].
Примесь F: (6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[(2S)-2-метокси-2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [2395025-37-1].
Примесь H: (6R,7R)-3-[(карбамоилокси)метил]-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [37051-05-1].
Примесь I: (6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-3-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота.
Примесь J: N-[(5aR,6S)-6-метокси-1,7-диоксо-1,4,6,7-тетрагидро-3H,5aH-азето[2,1-b]фуро[3,4-d][1,3]тиазин-6-ил]-2-(тиофен-2-ил)ацетамид (цефокситинлактон) [1422023-33-3].
Примесь K: неизвестная структура.
Хроматографические условия
| Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
| Температура колонки | 35 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
| Объём пробы | 20 мкл. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–5 |
92 |
8 |
|
5–50 |
92 → 74 |
8 → 26 |
|
50–85 |
74 |
26 |
|
85–90 |
74 → 92 |
26 → 8 |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения Б, раствор сравнения А и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Цефокситин – 1 (около 26 мин); примесь A – около 0,83; примесь I – около 0,98; примесь H – около 1,06; примесь E или F – около 1,11; примесь E или F и примесь K – около 1,16; примесь B – 1,18; примесь J – 1,66.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, E+F+K, H, I и J используют хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цефокситина для идентификации пиков, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:
— разрешение (RS) между пиком примеси H и одним из пиков примесей E и F должно быть не менее 2,0;
— отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси I и цефокситина должно быть не менее 2,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
— площадь пика примеси I не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %);
— сумма площадей пиков примесей E, F и K не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);
— площадь пика примеси H не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);
— площадь пика примеси J не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,4 %);
— площадь пика каждой из примесей A и B не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,2 %);
— площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,10 %);
— сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 3,0 %).
Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).
Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 50 мг цефокситина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.
Бактериальные эндотоксины. Не более 0,13 ЕЭ на 1 мг цефокситина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Растворы используют свежеприготовленными.
Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 10:190:810.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор стандартного образца цефокситина натрия. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефокситина натрия, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор 2-(2-тиенил)уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг 2-(2-тиенил)уксусной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл раствора стандартного образца цефокситина натрия и 5,0 мл раствора 2-(2-тиенил)уксусной кислоты.
Хроматографические условия
| Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 25 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
| Объём пробы | 20 мкл; |
| Время хроматографирования | 12 мин. |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца цефокситина натрия и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками 2-(2-тиенил)уксусной кислоты и цефокситина должно быть не менее 3,5.
Содержание цефокситина натрия C16H16N3NaO7S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где | S1 | – | площадь пика цефокситина на хроматограмме испытуемого раствора; |
| S0 | – | площадь пика цефокситина на хроматограмме раствора стандартного образца цефокситина натрия; | |
| а1 | – | навеска субстанции, мг; | |
| a0 | – | навеска фармакопейного стандартного образца цефокситина натрия, мг; | |
| P | – | содержание цефокситина натрия в фармакопейном стандартном образце цефокситина натрия, %; | |
| W | – | суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %. |
ХРАНЕНИЕ
В герметично укупоренной упаковке, при температуре не выше 8 °C.
*Приводится для информации.