ФС.2.1.0214. Циклофосфамид моногидрат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Циклофосфамид моногидрат	ФС.2.1.0214
Циклофосфамид
Cyclophosphamidum monohydricum	Взамен ФС.2.1.0214.18

 

C7H15Cl2N2O2P·H2O	М.м. 279,10
[6055-19-2]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-[Бис(2-хлорэтил)амино]-1,3,2λ5-оксазафосфинан-2-он моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % циклофосфамида C₇H₁₅Cl₂N₂O₂P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или белые кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, умеренно растворим или растворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца циклофосфамида.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции циклофосфамида на хроматограмме раствора стандартного образца циклофосфамида (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды и прибавляют 5 мл нитрата серебра раствора 4,25 %; раствор должен остаться прозрачным. Раствор нагревают до кипения; должен образоваться белый осадок, который растворяется в аммиака растворе концентрированном 25 % и вновь осаждаться при добавлении азотной кислоты разведённой 12,5 %.

4. Качественная реакция. Прибавляют к 0,1 г субстанции 3 мл азотной кислоты концентрированной и 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают до обесцвечивания. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 10 мл воды, нагревают до 60 °С и прибавляют 10 мл аммония молибдата раствора 10 %; должно появиться ярко-жёлтое окрашивание и через некоторое время выпасть жёлтый осадок.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 47 до 51 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y₆ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,1 до 7,0 (1 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3). Определение проводят немедленно после приготовления раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—ацетон—вода—метилэтилкетон 2:4:12:80.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца циклофосфамида. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца циклофосфамида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора А (200 мкг), испытуемого раствора Б (20 мкг), раствора стандартного образца циклофосфамида (20 мкг) и раствор сравнения (2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 10 мин.

На дно хроматографической камеры помещают чашку для выпаривания, содержащую калия перманганата раствор 5 %, к которому прибавляют равный объём хлористоводородной кислоты концентрированной. В камеру помещают горячую ТСХ пластинку, закрывают и выдерживают в течение 2 мин. Вынимают пластинку и помещают в поток холодного воздуха для удаления избытка хлора – при нанесении на пластину ниже уровня проб одной капли раствора крахмала с калия йодидом должно появляться лишь бледно-синее окрашивание (следует избегать длительного воздействия холодного воздуха). Опрыскивают раствором крахмала с калия йодидом и выдерживают в течение 5 мин.

Допустимое содержание примесей. Зона адсорбции любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора А по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Зоны адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Вода. От 5,7 % до 6,9 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Фосфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Фосфаты»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора полученного в испытании «Сульфаты» и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). 1,0 г субстанции растворяют в 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствие с ОФС «Остаточные органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

*Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

Переносят 0,2 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 250 мл, растворяют в 4 мл спирта 96 %, прибавляют 20 мл воды и 20 мл 0,5 М спиртового раствора калия гидроксида. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают и количественно переносят с помощью 20 мл воды в мерную колбу вместимостью 100 мл. Прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 16 %, 25 мл 0,1 М раствора нитрата серебра и доводят объём раствора водой до метки. Содержимое колбы хорошо перемешивают и фильтруют, отбрасывая первые 20 мл фильтрата. К 50 мл фильтрата прибавляют 10 мл азотной кислоты разведённой 16 %, 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 30 % и титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до появления красноватой окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 13,05 мг циклофосфамида C₇H₁₅Cl₂N₂O₂P.

ХРАНЕНИЕ

В плотно закрытой упаковке в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

 

*Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.