ФС.2.5.0009. Валерианы лекарственной корневища с корнями

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 г. N 120

Дата введения в действие: c 13.03.2024 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Валерианы лекарственной корневища с корнями	ФС.2.5.0009
Valerianae officinalis rhizomata cum radicibus	Взамен ФС.2.5.0009.15

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью или ранней весной, освобождённые от остатков листьев и стеблей, отмытые от земли и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего и культивируемого травянистого растения валерианы лекарственной – Valeriana officinalis L. s. l., сем. валериановых – Valerianaceae.

Cодержит:

— цельное сырьё: не менее 0,12 % сумму сесквитерпеновых кислот в пересчёте на валереновую кислоту в сухом сырье;

— измельчённое сырье, порошок: не менее 0,10 % сумму сесквитерпеновых кислот в пересчёте на валереновую кислоту в сухом сырье.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Корневища цельные или разрезанные, длиной до 4 см, толщиной до 3 см, часто с рыхлой или полой с поперечными перегородками сердцевиной. От корневища отходят многочисленные придаточные корни, редко подземные побеги – столоны. Корни гладкие или слегка
продольно-морщинистые, ломкие, различной длины, часто отделены от корневища.

Цвет корневищ и корней снаружи желтовато-коричневый, беловато-коричневый, коричневый, тёмно-коричневый, на изломе желтоватый, желтовато-белый, светло-коричневый, коричневый.Запах сильный, характерный.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10x) видны кусочки корневищ различной формы и цилиндрические кусочки корней с гладкой или слегка продольно-морщинистой поверхностью, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет кусочков желтовато-, серовато-, беловато-коричневый, коричневый или тёмно-коричневый. Запах сильный, характерный.

Порошок. При рассмотрении порошка под лупой (10×) видны кусочки корней и корневищ различной формы с гладкой или слегка продольно-морщинистой поверхностью, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет желтовато-коричневый с беловато-коричневыми, желтовато-белыми, светло-коричневыми, коричневыми и тёмно-коричневыми вкраплениями. Запах сильный, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрениимикропрепаратов поперечного среза корня должен быть виден эпидермис (ризодерма), клетки которого образуют корневые волоски в виде коротких или удлинённых сосочков. Клетки прилегающей гиподермы крупные, часто с каплями эфирного масла. Кора широкая, состоит из однородных округлых паренхимных клеток, заполненных крахмальными зёрнами. Молодые корни имеют первичное строение: в центральном осевом цилиндре видно кольцо эндодермы,состоящей из клеток с утолщёнными радиальными стенками, и группы сосудов. Редко встречаются старые корни с лучистой древесиной (вторичное строение).

На поперечном срезе корневища видна покровная ткань, представленная пробкой. Клетки паренхимы округлые, заполнены крахмальными зёрнами. По периметру нередко видны конусовидные зачатки корней. Открытые коллатеральные сосудисто-волокнистые пучки, часто искривлённые, окружают одним, реже двумя кольцами сердцевину.

В сердцевине располагается группа каменистых клеток, более старые корневища полые.

В препаратах соскоба сухого сырья должны быть видны крахмальные зёрна простые и 2–5-сложные, круглые или неправильной формы, что характерно для корневища.

Измельчённое сырьё, порошок. При рассмотрении «давленого» микропрепарата должны быть видны группы паренхимных клеток, часто с каплями эфирного масла и/или коричневым содержимым; фрагменты ризодермы с корневыми волосками; фрагменты пробки, состоящей из клеток с утолщёнными стенками; фрагменты сосудов с сетчатым, сетчато-лестничным и спиральным типами вторичного утолщения стенок; фрагменты паренхимы с зёрнами крахмала (в растворе глицерина или воде); изредка каменистые клетки.

Рисунок 1 – Валерианы лекарственной корневища с корнями

1 – фрагмент поперечного среза корня первичного строения: а – ризодерма с прилегающей гиподермой, б – центральный осевой цилиндр (40×);
2 – фрагмент поперечного среза корня первичного строения: а – ризодерма с корневыми волосками, б – клетки гиподермы с каплями эфирного масла (200×);
3 – фрагмент поперечного среза корня первичного строения:
а – клетки эндодермы, б – группа сосудов (200×); 4 – фрагмент корня: а – корневые волоски ризодермы (200×); 5 – фрагмент поперечного среза корневища:
а – сосудистоволокнистый пучок, б – клетки паренхимы с крахмальными зёрнами,
в – группа каменистых клеток в центре корневища (200×); 6 – фрагмент поперечного среза корневища: а – группа каменистых клеток (200×); 7 – фрагмент корневища: а – сетчатые сосуды с короткими искривлёнными члениками (200×).

 

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—гексан1:2.

Испытуемый раствор. Около1,0 г сырья измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл спирта 6 % и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения до комнатной температуры извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 3 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора, 5 мкл судана красного G раствора 0,025 % спиртового и 5 мкл флуоресцеина раствора0,025 % спиртового. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре в течение 5 мин и помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин и не более 40 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителейпройдётнеменее 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку обрабатывают анисового альдегида раствором спиртовым сернокислым (2), выдерживают в сушильном шкафу при 100–105 °С в течение 2–3 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора флуоресцеина должна обнаруживаться зона адсорбции светло-жёлтого цвета, на хроматограмме судана красного Gраствора должна обнаруживаться зона адсорбции розово- или фиолетово-красного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции синего или фиолетово-синего цвета, расположенные между зонами адсорбции флуоресцеина (снизу) и судана красного G (сверху) (ацетоксивалереновая и валереновая кислоты); допускается обнаружение других зон адсорбции.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 15,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья илекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 14,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 10,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, -не более 5 %.

Измельченное сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, -не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, -не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, -не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, — не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части валерианы (остатки стеблей и листьев, в том числе отделённые при анализе), а также старые отмершие корневища. Цельное сырьё, измельчённое сырьё– не более 5 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 2 %.

Минеральная примесь. Цельное сырьё– не более 3 %, измельчённое сырьё, порошок – не более 2 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма сесквитерпеновых кислот

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота разведённая 0,5 %.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,5 г (точная навеска) лекарственного растительного сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 50 мл спирта 96 % и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.Охлаждённое до комнатной температуры извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят спиртом 96 % до метки и тщательно перемешивают. Около 2–3 мл полученного извлечения фильтруютчерез мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), отбрасывая
1–2 мл фильтрата.

Раствор стандартного образца валереновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,005 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца валереновой кислоты, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования.

Хроматографические условия

Колонка	125 × 4,0 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель,5 мкм;
Предколонка	4 × 4 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель, 5 мкм;
Скорость потока	1 мл/мин;
Температураколонки	комнатная (20±2 °С);
Детектор	спектрофотометрический или диодная матрица;
Длина волны	220 нм;
Объём вводимой пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, об. %	ПФБ, об. %
0–5	47	53
5–7	47→50	53→50
7–9	50	50
9–16	50→60	50→40
16–20	60	40
20–25	60→100	40→0
25–30	100→47	0→53
30–45	47	53

Хроматографируют раствор стандартного образца валереновой кислоты и испытуемый раствор.

Относительное время удерживание валереновой кислоты– 1 (время удерживания–около 15 мин.), ацетоксивалереновой кислоты – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы

— фактор асимметрии пика (A_S)для ацетоксивалереновой и валереновой кислот должен быть не более 1,5;

Расчёт содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчёту подлежат основной пик валереновой кислотыи пикацетоксивалереновой кислоты.

Содержание суммы сесквитерпеновых кислот в пересчёте на валереновую кислоту в сухом сырье в процентах(Х) вычисляют по формуле:

где	S	—	сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика на хроматограмме раствора стандартного образца валереновой кислоты;
	а	—	навеска сырья, г;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца валереновой кислоты, г;
	Р	—	содержание валереновой кислоты в фармакопейном стандартном образцевалереновой кислоты, %;
	W	—	влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, экстрагент – спирт 70 %).

Содержит не менее 25 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70 %, в пересчёте на сухое сырьё.

Примечание – Сумму сесквитерпеновых кислот определяют для сырья, предназначенного для получения лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты) и экстракционных лекарственных форм; экстрактивные вещества, извлекаемые спиртом 70 %, определяют для сырья, предназначенного для получения экстракционных лекарственных форм.

УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».