ФС.2.1.0055. Амоксициллин тригидрат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Амоксициллин тригидрат	ФС.2.1.0055
Амоксициллин
Amoxicillinum trihydricum	Взамен ФС.2.1.0055.18

 

C16H19N3O5S·3H2O	М.м. 419,45
[61336-70-7]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота тригидрат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % амоксициллина C₁₆H₁₉N₃O₅S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %.

*Растворяется в разбавленных кислотах и разбавленных растворах щелочей.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в  средней  инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Помещают 2 мг субстанции в пробирку и смачивают 0,05 мл воды, прибавляют 2 мл формальдегида раствора в серной кислоте и встряхивают. Пробирку погружают на 1 мин в водяную баню. Раствор должен окраситься в тёмно-жёлтый цвет.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +290 до +315 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, при слабом нагреве или на ультразвуковой бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

pH раствора. От 3,5 до 5,5 (раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие амоксициллин и его примеси, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. В химический стакан помещают 250 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М и доводят значение pH натрия гидроксида раствором 10 % до 5,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор  10:990.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор  200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца цефадроксила ((6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота моногидрат [66592-87-8]), растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и 5,0 мл раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь С: (4S)-2-[5-(4-гидроксифенил)-3,6-диоксопиперазин-2-ил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота [94659-47-9].

Примесь J₂: амоксициллина димер [73590-06-4].

Примесь J₃: амоксициллина тример.

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы	50 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0– tR	92	8
tR– (tR+25)	92 → 0	8 → 100
(tR+25)–(tR+40)	0	100
(tR+40)–(tR+55)	92	8
tR – время удерживания амоксициллина, определённое по хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б).

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками амоксициллина и цефадроксила должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 1,0 %);

— сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 5,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика амоксициллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Вода. От 11,5 % до 14,5 % (ОФС«Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС«Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина не должно превышать 2,0 % (6 введений).

Содержание амоксициллина C₁₆H₁₉N₃O₅S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах () вычисляют по формуле:

где	S1	—	площадь пика амоксициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А);
	а1	—	навеска субстанции, мг;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;
	P	—	содержание амоксициллина в фармакопейном стандартном образце амоксициллина тригидрата, %;
	W	—	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

 

*Приводится для информации.