ФС.2.1.0401. Дактиномицин

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Дактиномицин ФС.2.1.0401
Дактиномицин
Dactinomycinum Взамен ФС 42-1554-87

 

C62H86N12O16

М.м. 1255,4

[50-76-0]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Акриноцинил-бис(L-треонил-D-валинил-L-пролинил-саркозил-N-метил-L-валинил)-лактон.

Содержит не менее 95,0 % и не более 103,0 % дактиномицина C62H86N12O16 в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Оранжево-красный кристаллический порошок.

*Чувствителен к свету. Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в ацетоне, мало растворим в метаноле и спирте 96 %, очень мало растворим в воде при температуре от 8 до 10 °C, практически нерастворим в воде при температуре 20 °С.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина (раздел «Родственные примеси»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 445 нм должна быть не менее 95,0 % и не более 103,0 % по отношению к раствору стандартного образца дактиномицина.

Отношение значений оптической плотности испытуемого раствора и раствора стандартного образца дактиномицина А240445 должно быть 1,4±0,1.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От −293 до −329 в пересчёте на сухое вещество (0,1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 мг субстанции в 1 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Раствор выдерживают в течение 30 мин при температуре от −5 до −7 °С и доводят до комнатной температуры.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор феноксазина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг феноксазина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают раствор стандартного образца дактиномицина и раствор феноксазина 2:1.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дактиномицина и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки 20 °С;
Скорость потока 1,9 мл/мин;
Детектор спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы 20 мкл;
Время хроматографирования 3-кратное от времени удерживания пика дактиномицина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дактиномицин – 1 (около 5 мин); феноксазин – около 0,8.

Пригодность хроматографической систем

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дактиномицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками феноксазина и дактиномицина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

— любая примесь – не более 0,5 %;

— сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают в вакууме до постоянной массы 0,1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С и остаточном давлении 5 мм.рт.ст.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 7 мкг дактиномицина в 0,5 мл воды на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 14 сут.

Бактериальные эндотоксины. Не более 80 ЕЭ на 1 мг дактиномицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца дактиномицина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина:

— фактор асимметрии пика (AS) дактиномицина должен быть не более 2,0;

— относительное стандартное отклонение площади пика дактиномицина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

— эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дактиномицина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание дактиномицина C62H86N12O16 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где

S1

площадь пика дактиномицина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0

площадь пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина;

a1

навеска субстанции, мг;

a0

навеска фармакопейного стандартного образца дактиномицина, мг;

P

содержание дактиномицина в фармакопейном стандартном образце дактиномицина, %;

W

потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.

Добавить комментарий