ФС.2.1.0401. Дактиномицин
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Дактиномицин | ФС.2.1.0401 |
Дактиномицин | |
Dactinomycinum | Взамен ФС 42-1554-87 |
|
|
C62H86N12O16 |
М.м. 1255,4 |
[50-76-0] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Акриноцинил-бис(L-треонил-D-валинил-L-пролинил-саркозил-N-метил-L-валинил)-лактон.
Содержит не менее 95,0 % и не более 103,0 % дактиномицина C62H86N12O16 в пересчёте на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Оранжево-красный кристаллический порошок.
*Чувствителен к свету. Гигроскопичен.
Растворимость. Растворим в ацетоне, мало растворим в метаноле и спирте 96 %, очень мало растворим в воде при температуре от 8 до 10 °C, практически нерастворим в воде при температуре 20 °С.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина (раздел «Родственные примеси»).
2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 445 нм должна быть не менее 95,0 % и не более 103,0 % по отношению к раствору стандартного образца дактиномицина.
Отношение значений оптической плотности испытуемого раствора и раствора стандартного образца дактиномицина А240/А445 должно быть 1,4±0,1.
ИСПЫТАНИЯ
Удельное вращение. От −293 до −329 в пересчёте на сухое вещество (0,1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 1 мг субстанции в 1 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Раствор выдерживают в течение 30 мин при температуре от −5 до −7 °С и доводят до комнатной температуры.
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.
Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 300:700.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.
Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.
Раствор феноксазина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг феноксазина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают раствор стандартного образца дактиномицина и раствор феноксазина 2:1.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дактиномицина и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.
Хроматографические условия
Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |
Скорость потока | 1,9 мл/мин; |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |
Объём пробы | 20 мкл; |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика дактиномицина. |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Дактиномицин – 1 (около 5 мин); феноксазин – около 0,8.
Пригодность хроматографической систем
На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дактиномицина должно быть не менее 10.
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками феноксазина и дактиномицина должно быть не менее 1,5.
Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):
— любая примесь – не более 0,5 %;
— сумма примесей – не более 3,0 %.
Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.
Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают в вакууме до постоянной массы 0,1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С и остаточном давлении 5 мм.рт.ст.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 7 мкг дактиномицина в 0,5 мл воды на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 14 сут.
Бактериальные эндотоксины. Не более 80 ЕЭ на 1 мг дактиномицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».
Хроматографируют раствор стандартного образца дактиномицина и испытуемый раствор.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина:
— фактор асимметрии пика (AS) дактиномицина должен быть не более 2,0;
— относительное стандартное отклонение площади пика дактиномицина должно быть не более 2,0 % (6 введений);
— эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дактиномицина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.
Содержание дактиномицина C62H86N12O16 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:
где |
S1 |
— |
площадь пика дактиномицина на хроматограмме испытуемого раствора; |
S0 |
— |
площадь пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина; | |
a1 |
— |
навеска субстанции, мг; | |
a0 |
— |
навеска фармакопейного стандартного образца дактиномицина, мг; | |
P |
— |
содержание дактиномицина в фармакопейном стандартном образце дактиномицина, %; | |
W |
– |
потеря в массе при высушивании, %. |
ХРАНЕНИЕ
В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.
*Приводится для информации.