ФС.2.1.0429. Канамицина сульфат кислый

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Канамицина сульфат кислый	ФС.2.1.0429
Канамицин
Kanamycini sulfas acidus	Вводится впервые

 

C18H36N4O11·xH2SO4	М.м. 582,6 (моносульфат) М.м. 484,5 (основание)

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

O-3-Амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1®6)-O-[6-амино-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1®4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат.

Канамицина сульфат кислый является производной формой канамицина моносульфата, полученный путём биосинтеза с добавлением серной кислоты. Активность не менее 670 ЕД/мг в пересчёте на сухое вещество.

Один микрограмм химически чистого канамицина соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

*Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и ацетоне.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля_.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку выдерживают при температуре 110 °С в течение 1 ч.

Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М.

Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды.

Раствор стандартного образца канамицина моносульфата. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата в 10 мл воды.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата, 10 мг фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата и 10 мг фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата в 10 мл воды.

Реактив для детектирования. Смешивают равные объёмы 1,3-дигидроксинафталина раствора 0,2 % и серной кислоты раствора 50 %.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца канамицина моносульфата и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором для детектирования и нагревают при температуре 150 °С в течение 5–10 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 3 чётко разделённые зоны адсорбции.

Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца канамицина моносульфата.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл нингидрина раствора 1 % и нагревают на водяной бане; должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления производного. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл пикриновой кислоты раствора 1 %, при необходимости инициируют кристаллизацию трением стеклянной палочкой о стенки сосуда и оставляют стоять для образования осадка. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 20 мл воды и сушат при температуре 100 °С. Температура плавления около 235 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От +112 до +123 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y₇ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,5 до 8,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Канамицин В. Не более 4 %. Испытание проводят методом ТСХ в условиях испытания «Идентификация 1. Тонкослойная хроматография», со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,10 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца канамицина В сульфата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца канамицина B сульфата (O-3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1®6)-O-[2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил-(1®4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1) [29701-07-3]), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 4 мкл испытуемого раствора (20 мкг) и раствора стандартного образца канамицина В сульфата (0,8 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе тёплого воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина и олова(II) хлорида реактивом (1) и выдерживают при температуре 110 °С в течение 15 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

Зона адсорбции канамицина В на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать аналогичную зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60 °С и остаточном давлении не превышающем 0,67 кПа (5 мм рт. ст.) в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. От 23,0 до 26,0 % в пересчёте на сухое вещество.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,175 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, тщательно перемешивают, рН полученного раствора доводят до значения 11 (потенциометрически) аммиака раствором 13,5 М. К полученному раствору прибавляют 10 мл 0,1 М раствора бария хлорида и около 0,5 мг индикатора фталеинового пурпурного. Избыток хлорида бария титруют 0,1 М раствором эдетата натрия до начала изменения окраски. Далее прибавляют 50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до исчезновения фиолетово-синей окраски раствора.

1 мл 0,1 М раствора бария хлорида соответствует 9,606 мг сульфатов SO₄.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

**Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1,8 мг канамицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Скорость введения – 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

**Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг канамицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

**Испытание на депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 10 мг канамицина в 1 мл воды для инъекций на 1 кг массы животного.

**Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар». В качестве стандартного образца используют фармакопейный стандартный образец канамицина моносульфата.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренном контейнере.

 

*Приводится для информации.

**Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.