ФС.2.1.0440. Леветирацетам
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Леветирацетам | ФС.2.1.0440 |
| Леветирацетам | |
| Levetiracetamum | Вводится впервые |
|
|
|
| C8H14N2O2 |
М.м. 170,21 |
| [102767-28-2] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
(2S)-2-(2-Оксопирролидин-1-ил)бутанамид.
Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % леветирацетама С8Н14N2O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или почти белый порошок.
Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в ацетонитриле, практически нерастворим в гептане.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца леветирацетама.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика леветирацетама на хроматограмме раствора стандартного образца леветирацетама (раздел «Количественное определение»).
ИСПЫТАНИЯ
Удельное вращение. От −76 до −82 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
1. Энантиомерная чистота
Подвижная фаза (ПФ). 2-Пропанол—гептан 18:82.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,200 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 2-пропаноле и доводят объём раствора этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) субстанции и 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Примечание
Примесь D: ((2R)-2-(2-оксопирролидин-1-ил)бутанамид [103765-01-1].
Хроматографические условия
| Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметифенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 10 мкм; |
| Температура колонки | 25 °С; |
| Скорость потока | 0,8 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |
| Объём пробы | 20 мкл; |
| Время хроматографирования | 1,4-кратное от времени удерживания пика леветирацетама. |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Леветирацетам – 1 (около 12 мин); примесь D – около 0,8.
Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:
— разрешение (RS) между пиками примеси D и леветирацетама должно быть не менее 1,5;
— фактор асимметрии пика (AS) леветирацетама должен быть не более 2,4.
Допустимое содержание примесей. Содержание примеси D вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография») и оно должно быть не более 0,8 %.
Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).
2. Примесь G
Буферный раствор. Растворяют 1,22 г натрия декансульфоната в 850 мл воды, прибавляют 1,3 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят значение рН калия гидроксида раствором 20 % до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 15:85.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси G и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси G и 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.
Примечание
Примесь G: (2S)-2-аминобутанамид [143164-46-9].
Хроматографические условия
| Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 27 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 200 нм; |
| Объём пробы | 50 мкл; |
| Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика леветирацетама. |
Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Леветирацетам – 1 (около 4 мин); примесь G – около 3,8.
Идентификация примесей. Для идентификации примеси G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками леветирацетама и примеси G должно быть не менее 5,0.
Содержание примеси G в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где |
|
— | площадь пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
|
— | площадь пика примеси G на хроматограмме раствора сравнения; | |
|
|
— | навеска фармакопейного стандартного образца примеси G, мг; | |
|
|
— | навеска субстанции, мг; | |
|
|
— | содержание примеси G в фармакопейном стандартном образце примеси G, %; | |
|
|
– | молекулярная масса примеси G; | |
|
|
– | молекулярная масса примеси G в виде гидрохлорида. |
Допустимое содержание примесей:
Примесь G – не более 0,05 %.
3. Другие примеси
Подвижная фаза (ПФА). Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор рН 5,5 5:95.
Подвижная фаза (ПФБ). Ацетонитрил.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.
Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора, растворяют в 80 мл ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.
Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.
Раствор для проверки чувствительности хроматоргафической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают.
Примечание
Примесь А: (2RS)-2-(2-оксопирролидин-1-ил)бутановая кислота [67118-31-4].
Примесь C: пиридин-2(1H)-ол [72762-00-6].
Примесь E: (1R)-1-фенилэтан-1-амин [3886-69-9].
Хроматографические условия
| Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 25 °С; |
| Скорость потока | 0,9 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |
| Объём пробы | 10 мкл. |
Режим хроматографирования
|
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
|
0–3 |
100 |
0 |
|
3–20 |
100 → 71 |
0 → 29 |
|
20–25 |
71 |
29 |
|
25–30 |
71 → 100 |
29 → 0 |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения, раствор стандартного образца примеси С и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Леветирацетам – 1 (около 11 мин); примесь С – около 0,5; примесь А – около 0,7; примесь Е – около 0,9.
Идентификация примесей. Для идентификации примесей А и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора; для идентификации примеси С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси С.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси Е и леветирацетама должно быть не менее 3,5.
Содержание примеси С в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где |
|
— | площадь пика примеси С на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
|
— | площадь пика примеси С на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С; | |
|
|
— | навеска фармакопейного стандартного образца примеси С, мг; | |
|
|
— | навеска субстанции, мг; | |
|
|
— | содержание примеси С в фармакопейного стандартном образце примеси С, %. |
Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
| где |
|
— | площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
|
— | площадь пика леветирацетама на хроматограмме раствора сравнения; | |
|
|
— | навеска субстанции. |
Допустимое содержание примесей:
— примесь А – не более 0,3 %;
— примесь С – не более 0,025 %;
— любая другая примесь – не более 0,05 %;
— сумма примесей – не более 0,4 %.
Не учитывают пики (за исключением пика примеси С), площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,03 %).
Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.
Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца леветирацетама и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.
Хроматографируют раствор стандартного образца леветирацетама и испытуемый раствор.
Содержание леветирацетама C8H14N2O2 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:
| где |
|
— | площадь пика леветирацетама на хроматограмме испытуемого раствора; |
|
|
— | площадь пика леветирацетама на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца леветирацетама; | |
|
|
— | навеска субстанции, мг; | |
|
|
— | навеска фармакопейного стандартного образца леветирацетама, мг; | |
|
|
— | суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %; | |
|
|
— | содержание леветирацетама в фармакопейном стандартном образце леветирацетама, %. |
ХРАНЕНИЕ
Не требует особых условий.