ФС.2.1.0679. Неостигмина метилсульфат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 г. № 120

Дата введения в действие: c 13.03.2024 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Неостигмина метилсульфат	ФС.2.1.0679
Неостигмина метилсульфат
Neostigmini metilsulfas	Взамен ФС 42-2503-87

 

C13H22N2O6S	М.м. 334,39
[51-60-5]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3-[(Диметилкарбамоил)окси]-N,N,N-триметиланилиний метилсульфат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % неостигмина метилсульфата C₁₃H₂₂N₂O₆S в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

*Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца неостигмина метилсульфата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 261 нм и 267 нм. Отношение значений оптической плотности A₂₆₇/A₂₆₁ должно составлять от 0,84 до 0,87.

Разрешающая способность для отношения оптических плотностей не менее 1,9.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 0,4 г калия гидроксида и 2 мл спирта 96 %, нагревают на водяной бане в течение 3 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 2 мл воды и 2 мл диазореактива; должно появиться оранжево-красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл воды и прибавляют 1 мл бария хлорида раствора 6,1 %; не должен выпадать осадок. Прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 10 мин; должен образоваться белый микрокристаллический осадок.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 144 до 149 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,25 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность 0,5 % раствора субстанции в смеси натрия карбоната раствор 10 %—вода 1:9, измеренная при длине волны 294 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,20 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 5,5 до 7,0 (2,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,2. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 4,3 г натрия лаурилсульфата в 710 мл буферного раствора и прибавляют 290 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор 3-диметиламинофенола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг 3-диметиламинофенола (примесь В), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом примеси А в 1,0 мл раствора 3-диметиламинофенола.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл ПФ и 1,0 мл раствора сравнения.

Примечание

Примесь A: 3-гидрокси-N,N,N-триметиланилиний.

Примесь В: 3-(диметиламино)фенол [99-07-0].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °C;
Скорость потока	1,6 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы	50 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания пика неостигмина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Неостигмин – 1 (около 20 мин); примесь В – около 0,56; примесь A – около 0,61.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика неостигмина должно быть не менее 25.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками примеси В и примеси А должно быть не менее 1,5.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика примеси В не должна превышать 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,01 %);

— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

— сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики (за исключением пика примеси В), площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,025 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 0,6 г субстанции в 15 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения 5 мл раствора, полученного в испытании «Сульфаты», разбавляют водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

**Бактериальные эндотоксины. Не более 58 ЕЭ на 1 мг неостигмина метилсульфата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В колбу Кьельдаля помещают 0,5 г (точная навеска) растёртой субстанции и растворяют в 325 мл воды. Колбу присоединяют к прибору для определения азота, из делительной воронки медленно прибавляют 15 мл натрия гидроксида раствора 40 % и отгоняют аммиак в приёмник, в который предварительно помещают 15 мл борной кислоты раствора 4 % и 0,3 мл смешанного индикатора раствора. Отгонку ведут до получения около 200 мл раствора. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 33,44 мг неостигмина метилсульфата C₁₃H₂₂N₂O₆S.

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.

**Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.