ФС.2.1.0545. Пеметрексед динатрия гептагидрат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Пеметрексед динатрия гептагидрат	ФС.2.1.0545
Пеметрексед
Pemetrexedum dinatricum heptahydricum	Вводится впервые

 

C20H19N5Na2O6·7H2O	М.м. 597,49 М.м. 471,37 (безводный)
[357166-29-1]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-2-{4-[2-(2-Амино-4-оксо-4,7-дигидро-1H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}пентандикарбоксилат динатрия гептагидрат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % пеметрекседа динатрия C₂₀H₁₉N₅Na₂O₆ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика пеметрекседа на хроматограмме раствора стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

*Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,56 г субстанции в 10,0 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 580 нм, не должна превышать 0,10 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН. От 7,5 до 8,4 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления или хранят при температуре 2–8 °С не более 24 ч.

Буферный раствор. Растворяют 1,45 г аммония формиата в 900 мл воды и доводят значение рН муравьиной кислотой безводной до 3,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг субстанции, растворяют в 80 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической  системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в 7 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор нагревают при 70 °С в течение 40 мин и охлаждают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: (2S)-2-{4-[2-(2-Амино-1-метил-4-оксо-4,7-дигидро-1H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}пентандикарбоновая кислота [869791-42-4].

Примесь В: (2S,2′S)-2,2′-{[(5R)-2,2′-Диамино-4,4′,6-триоксо-1,4,4′,6,7,7′-гексагидро-1′H,5H-[5,6′-бипирроло[2,3-d]пиримидин]-5,5′-диил]бис[(этан-2,1-диил)бензол-4,1-диил]карбонилимино)}дипентандиовая кислота [1802552-04-0].

Примесь С: (2S,2′S)-2,2′-{[(5S)-2,2′-Диамино-4,4′,6-триоксо-1,4,4′,6,7,7′-гексагидро-1′H,5H-[5,6′-бипирроло[2,3-d]пиримидин]-5,5′-диил]бис[(этан-2,1-диил)бензол-4,1-диил]карбонилимино)}дипентандиовая кислота [1802552-16-4].

Примесь D: (2S)-2-[(4S)-4-{4-[2-(2-Амино-4-оксо-4,7-дигидро-3H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}-4-карбоксибутанамидо]пентандикарбоновая кислота [144051-68-3].

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3,5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 250 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–3	100	0
3–45	100 → 0	0 → 100

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пеметрексед – 1 (около 25 мин); примесь А ‒ около 0,82; примесь В – около 0,87; примесь С ‒ около 0,88; примесь D ‒ около 0,91.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используется для идентификации пиков примесей B и С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика пеметрекседа должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика каждой из примесей А, D не должны более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

— суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Энантиомерная чистота (примесь Е). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления или хранят при температуре 2–8 °С не более 24 ч.

Буферный раствор. Растворяют 8,0 г β-циклодекстрина в 900 мл воды, прибавляют 15 мл триэтиламина, 6 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 6,00. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 12 мг субстанции, растворяют в 40 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 6 мг стандартного образца пеметрекседа для проверки пригодности системы, растворяют в 15 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь Е: (2R)-2-{4-[2-(2-Амино-4-оксо-4,7-дигидро-3H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}пентандикарбоновая кислота [150399-23-8].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	40 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 230 нм;
Объём пробы	50 мкл;
Время хроматографирования	1,5-кратное от времени удерживания пика пеметрекседа.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пеметрексед – 1 (около 25 мин); примесь Е – около 0,94.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и пеметрекседа должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

— фактор асимметрии пика (A_S) пеметрекседа должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Промывка колонки

Время, мин	ПФ, %	Вода, %	Ацетонитрил,%
0–4	100 → 0	0 → 50	0 → 50
4–9	0	50	50
9–14	0	50 → 10	50 → 90
14–54	0	10	90
54–69	0	10 → 95	90 → 5
69–100	0	95	5

Вода. От 19,0 % до 22,1 %.(ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 20 мг (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления или хранят при температуре 2–8 °С не более 24 ч.

Буферный раствор. Растворяют 1,7 мл уксусной кислоты ледяной в 900 мл воды и доводят значение рН натрия гидроксида раствором 10 М до 5,30, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 110:890.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3,5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	2,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 285 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	10 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата:

— фактор асимметрии пика (A_S) пеметрекседа должен быть не более 2,5;

— относительное стандартное отклонение площади пика пеметрекседа должно быть не более 2,0 % (6 введений);

— эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику пеметрекседа, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание пеметрекседа динатрия C₂₀H₁₉N₅Na₂O₆ в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где		–	площадь пика пеметрекседа на хроматограмме испытуемого раствора;
		–	площадь пика пеметрекседа на хроматограмме раствора стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата;
		–	навеска субстанции, мг;
		–	навеска стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата, мг;
		–	содержание пеметрекседа динатрия в стандартном образце пеметрекседа динатрия гептагидрата, %;
		–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

 

*Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.