ФС.2.1.0164. Преднизолон

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Преднизолон	ФС.2.1.0164
Преднизолон
Prednisolonum	Взамен ФС.2.1.0164.1

 

C21H28O5	М.м. 360,44
[50-24-8]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

11β,17,21-Тригидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 96,5 % и не более 102,0 % преднизолона C₂₁H₂₈O₅ в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в метаноле и спирте 96 %, умеренно растворим в ацетоне, очень мало растворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца преднизолона.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца преднизолона (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Прибавляют 2 мг испытуемой субстанции к 2 мл серной кислоты концентрированной, встряхивают до растворения и оставляют на 5 мин; должно появиться красное окрашивание, при наблюдении в ультрафиолетовом свете при 365 нм должна быть видна красно-коричневая флуоресценция. К полученному раствору осторожно прибавляют 10 мл воды; окраска должна побледнеть или исчезнуть, при наблюдении в ультрафиолетовом свете при 365 нм должна быть видна жёлтая или зеленовато-жёлтая флуоресценция и должен образоваться серый хлопьевидный осадок или наблюдаться помутнение раствора.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +113 до +119 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси.Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы преднизолона в процессе испытания защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—метанол 500:500.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона для идентификации пиков (содержащего примеси F и J), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, B и C), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (гидрокортизон): 11β,17,21-тригидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [50-23-7].

Примесь B (преднизон): 17,21-дигидроксипрегна-1,4-диен-3,11,20-трион [53-03-2].

Примесь C (преднизолона ацетат): 11β,17-дигидрокси-3,20-диоксопрегна-1,4-диен-21-ил)ацетат [52-21-1].

Примесь F(11-эпи-преднизолон): 11α,17,21-тригидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион [600-90-8].

Примесь J (11-дезоксипреднизолон): 17,21-дигидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион [1807-14-3].

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки	40 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы	10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–14	60	40
14–20	60 → 20	40 → 80
20–25	20	80

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Преднизолон – 1 (около 12 мин); примесь F – около 0,7; примесь В – около 0,9; примесь A – 1,05; примесь J – 1,5; примесь C – 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей A, B и C используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу преднизолона для проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации примесей F и J используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу преднизолона для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками преднизолона и примеси A должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика примеси А не должна превышать десятикратную площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

— площадь пика примеси F не должна превышать пятикратную площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

— площадь пика каждой из примесей B, C и J не должна превышать трёхкратную площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

— сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 15 раз превышать площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца преднизолона. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца преднизолона, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца преднизолона и испытуемый раствор.

Содержание преднизолона C₂₁H₂₈O₅ в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах () вычисляют по формуле:

где	S1	—	площадь пика преднизолона на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора стандартного образца преднизолона;
	а1	—	навеска субстанции, мг;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца преднизолона, мг;
	W	—	потеря в массе при высушивании, %;
	P	—	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце преднизолона, %.

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.