ФС.2.1.0645. Ванкомицина гидрохлорид

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ванкомицина гидрохлорид	ФС.2.1.0645
Ванкомицин
Vancomycini hydrochloridum	Вводится впервые

 

C66H75Cl2N9O24·HCl	М.м. 1485,7
[1404-93-9]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(1S,2R,18R,19R,22S,25R,28R,40S)-22-(2-Амино-2-оксоэтил)-48-{[2-O-(3-C-амино-2,3,6-тридезокси-3-метил-a-L-ликсо-гексопиранозил)-b-D-глюкопиранозил]окси}-2,18,32,35,37-пентагидрокси-19-[(2R)-4-метил-2-(метиламино)пентанамидо]-20,23,26,42,44-пентаоксо-5,15-дихлор-7,13-диокса-21,24,27,41,43-пентаазаоктацикло[26.14.2.23,6.214,17.18,12.129,33.010,25.034,39]пентаконта-3,5,8(48),9,11,14,16,29(45),30,32,34,36,38,46,49-пентадекаен-40-карбоновой кислоты гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 900 мкг/мг ванкомицина C₆₆H₇₅Cl₂N₉O₂₄ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Вещество, продуцируемое некоторыми штаммами Amycolatopsis orientalis.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый микрокристаллический порошок. *Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ванкомицина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания основного пика (Ванкомицин В) на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел «Ванкомицин В»).

3. Качественная реакция. Раствор субстанции 10 % должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в максимуме поглощения при длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 2,5 до 4,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Приготовление испытуемого раствора. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Ванкомицин В. Не менее 91,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2 мл триэтиламина в воде и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор 10:70:920.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор 10:290:700.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного образца ванкомицина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Раствор переносят в коническую колбу с пришлифованной пробкой, нагревают до 65 °С и выдерживают при этой температуре в течение 24 ч, после чего охлаждают до комнатной температуры. Раствор используют в течение 4 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–13	100	0
13–22	100 → 0	0 → 100
22–27	0	100
27–30	0 → 100	100 → 0

Уравновешивают колонку в течение не менее 30 мин смесью ПФА—ПФБ в соотношении 0:100, уравновешивают колонку в течение 15 мин смесью ПФА—ПФБ в соотношении 100:0.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, испытуемые растворы А и Б.

Время удерживания ванкомицина В – около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика ванкомицина В должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между двумя основными пиками должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме испытуемого раствора Б:

— фактор асимметрии пика (A_S) ванкомицина В должен быть не более 1,6;

— относительное стандартное отклонение площади пика ванкомицина В должно быть не более 2,0 % (6 введений);

— эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику ванкомицина В, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание ванкомицина В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где		—	площадь пика ванкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора Б;
		—	сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
	25	—	коэффициент разведения испытуемого раствора А.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,2 % от площади основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А, а также пики, соответствующие пикам на хроматограмме ПФ.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Ванкомицин В».

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где		—	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора А;
		—	площадь пика ванкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора Б;
		—	сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
	25	—	коэффициент разведения испытуемого раствора А.

Допустимое содержание примесей:

— любая примесь – не более 4,0 %;

— сумма примесей – не более 9,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 % от площади основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А, а также пики, соответствующие пикам на хроматограмме ПФ.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола». Для приготовления эталонного раствора к 3 мл свинец стандартный раствор 10 мкг/мл прибавляют 7 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 4 мг субстанции, растворённой в 0,5 мл воды для инъекций, на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг субстанции (Ванкомицин В) (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят микробиологическим методом в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.