2.1. Фармацевтические субстанции синтетического происхождения

ФС.2.1.0596. Зидовудин

26.10.202426.10.2024 Виктор

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Зидовудин	ФС.2.1.0596
Зидовудин
Zidovudinum	Взамен ФС 42-3412-97

C₁₀H₁₃N₅O₄

М.м. 267,24

[30516-87-1]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1-(3-Азидо-2,3-дидезокси-b-D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % зидовудина C₁₀H₁₃N₅O₄в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый с коричневатым оттенком кристаллический порошок.

*Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в воде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца зидовудина.

Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец зидовудина по отдельности растворяют в минимальном количестве воды, упаривают в вакууме, высушивают в вакуумном эксикаторе над фосфора(V) оксидом и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика зидовудина на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +60,5 до +63,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции(мутности) жидкостей»). При необходимости раствор подогревают.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY₅ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Сумма примесей, определённая методами 1 и 2, – не более 1,0%.

1. Примеси A, B, C, E, F, G

Буферный раствор. Растворяют 2,0 г ацетата аммония в 850 мл воды, доводят pH до 6,80 уксусной кислотой разведённой 12 %. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 4:20:76.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца зидовудина для проверки пригодности системы, содержащего примесь G, растворяют в растворе стандартного образца примеси B и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в смеси растворителей (ацетонитрил—метанол—буферный раствор 4:40:56) и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 1-(2,3-дидезокси-β-D-глицеро-пент-2-ен-фуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [3056-17-5].

Примесь B: З’-хлор-3′-дезокситимидин [25526-94-7].

Примесь C: 5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [65-71-4].

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь E: 1-(2-дезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [50-89-5].

Примесь F: 1-(2-Дезокси-b-D-трео-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [16053-52-4].

Примесь G: З’-(З’-азидо-З’-дезокситимидин-3-ил)-З’-дезокситимидин [148665-49-0].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 265 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–3	95	5
3–18	95 → 85	5 → 15
18–28	85 → 30	15 → 70
28–43	30	70

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зидовудин — 1 (около 16 мин); примесь B — около 1,05; примесь G — около 1,5; примесь D — около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B и G используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу зидовудина для пригодности системы. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси трифенилметанола.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками зидовудина и примеси B должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика примеси G не должна превышать двукратную площадь пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

— площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Не учитывают пики, обусловленные примесью D, пики, элюирующиеся после пика примеси D, и пики, площадь которых менее 0,5 площади пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

2. Примеси D, J, K

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 10 мл добавляют 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь J: 1-[3-азидо-5-O-(трифенилметил)-2,3-дидезокси-b-D-эритро-пентофуранозил]-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [29706-84-1].

Примесь K: 1,1′,1″-(метоксиметантриил)трибензол [596-31-6].

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 210 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	10-кратное от времени удерживания пика зидовудина.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зидовудин – 1 (около 1,5 мин); примесь D – около 2,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора сравнения.

Содержание примеси D в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где	–	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
	–	площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D;
	–	навеска субстанции, мг.

Допустимое содержание примесей:

— любая примесь – не более 0,10 %.

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика примеси D, и пики, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,25 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

**Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг зидовудина в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси A, B, C, E, F, G» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют 10,0 мл испытуемого раствора из раздела «Родственные примеси» и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца зидовудина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца зидовудина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца зидовудина и испытуемый раствор.

Содержание зидовудина C₁₀H₁₃N₅O₄в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где	S₁	–	площадь пика зидовудина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S₀	–	площадь пика зидовудина на хроматограмме стандартного раствора;
	а₁	–	навеска субстанции, мг;
	а₀	–	навеска фармакопейного стандартного образца зидовудина, мг;
	W	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	P	–	содержание зидовудина в фармакопейном стандартном образце зидовудина, %.

ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

*Приводится для информации.

**Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Коэффициент востребованности 5

Вам также может понравиться

ФС.2.1.0074. Вальпроат натрия

ФС.2.1.0542. Осельтамивира фосфат

ФС.2.1.0468. Метилсалицилат