ФС.2.1.0357. Алендронат натрия тригидрат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Алендронат натрия тригидрат	ФС.2.1.0357
Алендроновая кислота
Natrii alendronas trihydricus	Вводится впервые

 

C4H12NNaO7P2·3H2O	М.м. 325,12
[121268-17-5]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(4-Амино-1-гидроксибутан-1,1-диил)бис(фосфонат) триводорода натрия тригидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % алендроната натрия C₄H₁₂NNaO₇P₂ в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в метиленхлориде.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В₇ или ВY₇ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 5,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примеси А и D

Раствор 9-флуоренилметилхлорформиата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г 9-флуоренилметилхлорформиата, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. Раствор используют сразу после приготовления.

Буферный раствор. Растворяют 5,88 г натрия цитрата, 2,84 г динатрия гидрофосфата безводного в 1900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 2000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 29,4 г натрия цитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 150:850.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Дериватизация. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, 5,0 мл натрия тетрабората раствора 0,05 М, 5,0 мл ацетонитрила и 5,0 мл раствора 9-флуоренилметилхлорформиата, встряхивают в течение 45 с, выдерживают в тёмном месте при комнатной температуре в течение 30 мин. К полученному раствору прибавляют 20 мл метиленхлорида, встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин. Используют прозрачный верхний слой.

Стандартный раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15,0 мг 4-аминобутановой кислоты (примесь А), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3,0 мг фармакопейного стандартного образца алендроната натрия для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примесь D), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

Контрольный раствор. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл растворителя и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

Примечание

Примесь А: 4-Аминобутановая кислота [56-12-2].

Примесь D: структура неизвестна.

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,1 мм, сополимер стирол-дивинилбензола, 10 мкм;
Температура колонки	45 °C;
Скорость потока	1,8 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 266 нм;
Объём пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–3	100	0
3–18	100 → 50	0 → 50
18–28	50 → 0	50 →100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор примеси А, испытуемый раствор и контрольный  раствор.

Относительное время удерживания соединений. Алендронат – 1 (около 7 мин); примесь D – около 1,4; примесь А – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму стандартного раствора; для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу алендроната натрия для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиками алендроната и примеси D должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,4.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

— примесь А – не более 0,15 %;

— любая другая примесь – не более 0,1 %;

— сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

2. *Примеси B и C

Подвижная фаза (ПФ). В химическом стакане смешивают 0,2 мл муравьиной кислоты безводной и 1000 мл воды, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 2 М до 3,5.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 г фосфорной кислоты концентрированной (примесь B) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор примеси C. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 г фосфористой кислоты (примесь C) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора А, 2,0 мл раствора примеси C и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В: фосфаты;

Примесь С: фосфиты.

Хроматографические условия

Колонка	150 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии, 7 мкм;
Температура колонки	35 °C;
Скорость потока	1,2 мл/мин;
Детектор	дифференциальный рефрактометрический;
Объём пробы	100 мкл;
Время хроматографирования	2-кратное от времени удерживания пика алендроната.

Хроматографируют раствор примеси B, раствор примеси C, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Алендронат – 1 (около 16 мин); примесь В – около 1,3; примесь С – 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика каждой из примесей B и С  не должна превышать площадь пика алендроната на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. От 16,1 до 17,1 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 140–145 °С.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Испытуемый раствор. В колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл (в случае интенсивного пенообразования используют колбу вместимостью 300 мл) помещают 1,0 г субстанции, фиксируют колбу под углом 45°, прибавляют 5 мл смеси серная кислота концентрированная—азотная кислота концентрированная 8:10 до полного увлажнения порошка. Содержимое колбы осторожно нагревают до начала реакции, оставляют колбу. После замедления реакции прибавляют 5 мл той же смеси, нагревая после каждого прибавления. Повторяют процедуру до тех пор, пока общий объём прибавленной смеси не достигнет 18 мл, после чего усиливают нагревание и осторожно кипятят до потемнения раствора. Полученный раствор охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной и снова нагревают до потемнения раствора. Процедуру повторяют до тех пор, пока раствор не перестанет темнеть. Усиливают нагревание до получения плотных белых паров. Полученный раствор охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 5 мл воды, осторожно нагревают до появления плотных белых паров и продолжают нагревать до тех пор, пока объём раствора не уменьшится до 2–3 мл. Полученный раствор охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 5 мл воды. Если раствор имеет жёлтую окраску, то к нему осторожно прибавляют 1 мл водорода пероксида и нагревают до появления паров белого цвета и уменьшения объёма до 2–3 мл. В случае жёлтого окрашивания раствора, прибавляют 5 мл воды и 1 мл водорода пероксида до обесцвечивания раствора. Полученный раствор охлаждают и доводят водой до 10 мл.

Определение тяжёлых металлов проводят, сравнивая с эталоном, состоящим из 2 мл эталонного раствора 2,6 мл воды и такого же количества реактивов, какое добавлено к испытуемому раствору.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси B и C» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата и испытуемый раствор.

Содержание алендроната натрия C₄H₁₂NNaO₇P₂ в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах () вычисляют по формуле:

где	S1	—	площадь пика алендроната на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика алендроната на хроматограмме раствора стандартного образца алендроната натрия тригидрата;
	a1	—	навеска субстанции, мг;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, мг;
	P	–	содержание алендроната натрия в фармакопейном стандартном образце алендроната натрия тригидрата, %;
	W	–	потеря в массе при высушивании, %.

ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

 

*Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.