ФС.2.1.0631. Ацетилкарнитина гидрохлорид

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Ацетилкарнитина гидрохлорид	ФС.2.1.0631
Ацетилкарнитин
Acetylcarnitini hydrochloridum	Вводится впервые

 

C9H17NO4·HCl	М.м. 239,70
[5080-50-2]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(3R)-3-(Ацетилокси)-4-(триметилазанийил)бутаноата гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % ацетилкарнитина гидрохлорида C₉H₁₇NO₄·HCl в пересчёте на сухое вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок со слабым характерным запахом уксусной кислоты.

*Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 % и практически нерастворим в хлороформе.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 650 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетилкарнитина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют при кипячении 0,1 г субстанции в 2 мл серной кислоты растворе 50 %. Должен ощущаться запах уксусной кислоты.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,04 г субстанции в 2 мл воды. Полученный раствор должен давать реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 184 до 188 °С (с разложением,ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От –27,2 до –28,2 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным  (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y₇ (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 1,5 до 2,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г (точная навеска) калия дигидрофосфата в 700 мл воды и доводят значение рН до 4,7 фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 0,2 М; количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил 350:650.

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор хлористоводородной кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл воды, 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор стандартного образца левокарнитина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левокарнитина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности 30 суток.

В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят ПФ до метки и перемешивают.

Раствор стандартного образца кротонобетаина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кротонобетаина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности 30 суток.

В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствор полученного раствора, доводят ПФ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. К 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 0,1 мл раствора фармакопейного стандартного образца кротонобетаина и 1,0 мл раствора фармакопейного стандартного образца левокарнитина.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Примечание

Примесь 1 (кротонобетаин): 4-(триметилазанийил)бут-2-еноат [927-89-9].

Примесь 2 (левокарнитин):  (3R)-3-гидрокси-4-(триметилазанийил)бутаноат [541-15-1].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель аминопропилсилильный для хроматографии,5 мкм;
Температура колонки	30 °С;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 205 нм;
Объём пробы	10 мкл;
Время хроматографирования	3-кратное от времени удерживания пика ацетилкарнитина.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор хлористоводородной кислоты и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетилкарнитин – 1 (около 5 мин); хлорид – около 0,7; примесь 2 – около 1,2; примесь 1– около 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

— разрешение (R_s) между пиками ацетилкарнитина и примеси 2 должно быть не менее 2,0;

— разрешение (R_s) между пиками примеси 2 и примеси 1 должно быть не менее 1,0.

На хроматограмме испытуемого раствора относительное стандартное отклонение площади пика ацетилкарнитина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 0,014; примесь 2 – 1,3.

Содержание примеси 2 (левокарнитина) в субстанции в процентах (Х₁) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика левокарнитина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика левокарнитина на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы;
		—	навеска субстанции, мг;
		—	навеска фармакопейного стандартного образца  левокарнитина, мг;
	W	—	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	P	—	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце левокарнитина, %.

Содержание примеси 1 (кротонобетаина) в субстанции в процентах (Х₂) вычисляют по формуле:

 

где	S1	–	площадь пика кротонабетаина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	—	площадь пика кротонабетаина на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы;
	а1	—	навеска субстанции, мг;
	а0	—	навеска фармакопейного стандартного образца  кротонабетаина, мг;
	W	—	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	P	—	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце кротонабетаина, %.

Допустимое содержание примесей:

-примесь 2 – не более 1,0 %;

-примесь 1 – не более 0,5 %;

— любая другая примесь – не более 1,8 %;

— суммарное содержание примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пик хлорид-аниона и пики с площадью менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

**Бактериальные эндотоксины. Не более 0,23 ЕЭ на 1 мг ацетилкарнитина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода жёлтой окраски в синюю (индикатор – 0,1 мл бромтимолового синего раствор 0,04 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 23,97 мг ацетилкарнитина гидрохлорида C₉H₁₇NO₄·HCl

ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте.

 

*Приводится для информации.

**Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.