ФС.2.1.0355. Фосфазид
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
Фосфазид | ФС.2.1.0355 |
Фосфазид | |
Phosphazidum | Взамен ВФС 42-3497-99 |
|
|
C10H13N5NaO6P |
М.м. 353,20 |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
[β-D-3-Азидо-1-(5-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-1-ил)-1,2,3-тридезоксирибофуранозил-5]фосфонат натрия.
Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % фосфазида C10H13N5NaO6P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком порошок с характерным запахом.
*Гигроскопичен.
Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе и гексане.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 нм до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 266 нм и минимум поглощения при 234 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.
2. Качественная реакция. Растворяют 150 мг субстанции в 2 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Удельное вращение. От +22 до +28 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).
Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
рН раствора. От 6,5 до 8,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.
Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—аммония ацетата раствор 0,05 М 50:950.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают, 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор стандартного образца фосфазида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фосфазида, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.
Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца фосфазида и доводят объём раствора водой до метки.
Хроматографические условия
Предколонка | 4 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии; |
Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |
Объём пробы | 20 мкл. |
Режим хроматографирования
Время, мин |
ПФА, % |
ПФБ, % |
0–5 |
90 |
10 |
5–15 |
90 → 70 |
10 → 30 |
15–30 |
70 → 0 |
30 → 100 |
30–35 |
0 |
100 |
35–40 |
0 → 90 |
100 → 10 |
40–45 |
90 |
10 |
Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца фосфазида и испытуемый раствор.
**Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фосфазида должно быть не менее 10.
На хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида:
— фактор асимметрии пика (AS) фосфазида должен быть не более 1,5;
— относительное стандартное отклонение площади пика фосфазида должно быть не более 2,0 % (6 введений);
Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:
где |
S1 |
— | площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; |
S0 |
— | площадь пика фосфазида на хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида; | |
a0 |
— | навеска фармакопейного стандартного образца фосфазида, мг; | |
a1 |
— | навеска субстанции, мг; | |
P |
— | содержание фосфазида в фармакопейном стандартном образце фосфазида, %. |
Допустимое содержание примесей:
— любая примесь – не более 1,0 %;
— сумма всех примесей – не более 3,0 %.
Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.
Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.
Раствор стандартного образца фосфазида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фосфазида, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.
На хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида относительное стандартное отклонение площади пика фосфазида должно быть не более 2,0 % (6 введений).
Содержание фосфазида C10H13N5NaO6P в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
где |
S1 |
– |
площадь пика фосфазида на хроматограмме испытуемого раствора; |
S0 |
– |
площадь пика фосфазида на хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида; |
|
а1 |
– |
навеска субстанции, мг; | |
а0 |
– |
навеска фармакопейного стандартного образца фосфазида, мг; |
|
P |
– |
содержание фосфазида в фармакопейном стандартном образце фосфазида, %; | |
W |
– |
суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %. |
ХРАНЕНИЕ
В сухом, защищённом от света месте.
*Приводится для информации.
**Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.