2.1. Фармацевтические субстанции синтетического происхождения

ФС.2.1.0448. Линкомицина гидрохлорид моногидрат

28.10.202428.10.2024 Виктор

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Линкомицина гидрохлорид моногидрат	ФС.2.1.0448
Линкомицин
Lincomycini hydrochloridum monohydricus	Взамен ФС 42-2223-92

C₁₈H₃₄N₂O₆S·HCl·H₂O

М.м. 461,0

М.м. 443,0 (безводный)

[7179-49-9]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S,4R)-1-Метил-4-пропил—N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамида гидрохлорид моногидрат.

Представляет собой смесь антибиотиков, продуцируемых штаммами Streptomyces lincolnensis var. lincolnensis или полученных другим способом.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % линкомицина гидрохлорида C₁₈H₃₄N₂O₆S·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в ацетоне.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +135° до +150° в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (4 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным
(ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдержать сравнение с эталоном Y₆(ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 34 г фосфорной кислоты концентрированной в 900 мл воды и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 6,10. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 80:170:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида для проверки пригодности системы (содержит примеси А, В и С) в 2 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Линкомицин B: (2S,4R)-1-метил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]-4-этилпирролидин-2-карбоксамид [2520-24-3].

Примесь А: (2R,4R)-1-метил-4-пропил—N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид.

Примесь В: (2S,4EZ)-1-метил-4-пропилиден—N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид [37744-65-3].

Примесь С: (2S,4R)-4-пропил—N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид [2256-16-8].

Хроматографические условия

Колонка	250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	50 °С;
Скорость потока	1,0 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 210 нм;
Объём пробы	20 мкл;
Время хроматографирования	5,5-кратное от времени удерживания пика линкомицина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В), раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Линкомицин – 1 (около 10 мин); примесь С – около 0,4; линкомицин В – около 0,5; примесь А – около 0,7; примесь В – около 1,2 (первый пик) и около 1,3 (второй пик).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R_S) между пиком линкомицина и первым пиком примеси В должно быть не менее 1,8.

На хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В):

— фактор асимметрии пика (A_S) линкомицина должен быть не более 2,0;

— относительное стандартное отклонение площади пика линкомицина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

— эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику линкомицина, должна составлять не менее 2500 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика линкомицина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

— площадь пика примеси А не должна превышать пятикратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,5 %);

— сумма площадей пиков примеси В не должна превышать пятикратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,5 %);

— площадь пика примеси С не должна превышать двукратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,2 %);

— площадь пика единичной неидентифицированной примеси не должна превышать площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,10 %);

— сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (менее 0,05 %).

Линкомицин В. Не более 5,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Содержание линкомицина В в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где		–	площадь пика линкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора;
		–	площадь пика линкомицина на хроматограмме испытуемого раствора.

Вода. От 3,1 % до 4,6 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 %. ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 6) в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

*Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 2 мг линкомицина в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,50 ЕЭ на 1 мг линкомицина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А) и испытуемый раствор.

Содержание линкомицина гидрохлорида C₁₈H₃₄N₂O₆S·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где	–	площадь пика линкомицина на хроматограмме испытуемого раствора;
	–	площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А);
	–	навеска субстанции, мг;
	–	навеска фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида, мг;
	–	содержание линкомицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце линкомицина гидрохлорида, %;
	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.