ФС.2.1.0483. Тиопентал натрия
утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377
Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.
Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ
| Тиопентал натрия | ФС.2.1.0483 |
| Тиопентал | |
| Thiopentalum natricum | Взамен ФС 42–2492–87 |
|
|
|
| C11H17N2NaO2S |
М.м. 264,32 |
| [71-73-8] |
|
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
4,6-Диоксо-5-[(2RS)-пентан-2-ил]-5-этил-1,4,5,6-тетрагидропиридин-2-тиолат натрия (содержит 1:6 (моль/моль) карбоната натрия).
Cодержит не менее 84,0 % и не более 87,0 % тиопентала C11H18N2O2S и не менее 10,2 % и не более 11,2 % натрия Na в пересчёте на сухое вещество.
СВОЙСТВА
Описание. Желтовато-белый порошок.
*Гигроскопичен.
Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.
ИДЕНТИФИКАЦИЯ
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр тиопентала, полученный в испытании «Температура плавления тиопентала», в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тиопентала.
2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.
Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 %—метиленхлорид 5:15:80. В случае расслаивания смеси используют нижний слой.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.
Раствор стандартного образца тиопентала. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 85 мг фармакопейного стандартного образца тиопентала, растворяют в 10 мл натрия гидроксида раствора 2 М и доводят объём раствора водой до метки.
На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и раствора стандартного образца тиопентала (9 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 20 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сразу просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.
Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, степени подавления флуоресценции и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тиопентала.
3. Качественная реакция. Взбалтывают 0,1 г субстанции с 2 мл спирта 96 %, прибавляют 1 каплю кальция хлорида раствора 20 %, 2 капли кобальта нитрата раствора 5 % и 2 капли натрия гидроксида раствора 20 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.
4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).
ИСПЫТАНИЯ
Температура плавления тиопентала. От 158 до 162 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).
Растворяют 5,0 г субстанции в 50 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 10 %, происходит выделение пузырьков. Раствор взбалтывают с 20 мл 1,1-диметилэтилового эфира, отделяют эфирный слой, промывают его 10 мл воды, сушат над натрия сульфатом безводным и фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха, и остаток сушат при температуре от 100 до 105 °C. Определяют температуру плавления выделенного осадка.
Прозрачность раствора. Раствор 5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).
Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).
pH раствора. От 10,2 до 11,2 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Растворы используют свежеприготовленными.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—фосфорная кислота разведённая 0,1 % 350:650.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.
Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца смеси примесей тиопентала, содержащего примеси A, B, C и D, в 1 мл испытуемого раствора.
Примечание
Примесь A: 5-[(2RS)-пентан-2-ил]-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4,6(1H,5H)-дион [29639-67-6].
Примесь B: 5-[(2RS)-пентан-2-ил]-5-этилпиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-дион [76-74-4].
Примесь C: 5-(пентан-2-ил)-2-тиоксо-5-этил-2,3-дигидропиримидин-4,6(1H,5H)-дион [87171-21-9].
Примесь D: 2-(карбамотиоилкарбамоил)-3-метил-2-этилгексановая кислота [93227-84-0].
Хроматографические условия
| Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 25 °С; |
| Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |
| Объём пробы | 10 мкл; |
| Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания пика тиопентала натрия. |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Тиопентал натрия – 1 (около 20 мин); примесь A – около 0,3; примесь B – около 0,4; примесь C – около 0,9; примесь D – около 1,3.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу смеси примесей тиопентала, содержащего примеси A, B, C и D.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:
— разрешение (RS) между пиками примесей A и B должно быть не менее 1,5;
— разрешение (RS) между пиками примеси С и тиопентала должно быть не менее 1,5.
Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси B умножается на 1,5.
Допустимое содержание примесей:
— площадь пика примеси C не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %);
— площадь пика примеси B не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);
— площадь пика примеси D не должна превышать 0,6 площади пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);
— площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);
— сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 10 раз превышать площадь пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 5,0 %).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).
Потеря в массе при высушивании. Не более 2,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 100–105 °С и остаточном давлении 0,4 кПа (3 мм. рт. ст.).
Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 8,3 % и, после прекращения выделения газов, фильтруют.
Хлориды. Не более 0,033 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 35 мл воды и 10 мл азотной кислоты раствора 16 %. Трижды экстрагируют с помощью 25 мл трет-бутилметилового эфира и отбрасывают верхний слой. Удаляют органический растворитель из нижнего слоя нагреванием на водяной бане.
Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
**Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг тиопентала натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).
1. Тиопентал
Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 5 мл воды, прибавляют 2 мл серной кислоты раствора 9,8 % и экстрагируют 4 раза по 10 мл хлороформа. Объединённые экстракты фильтруют, упаривают досуха, остаток растворяют в 30 мл предварительно нейтрализованного диметилформамида и немедленно титруют 0,1 М раствором метилата лития до перехода жёлтой окраски в синюю (индикатор – 0,1 мл тимолового синего метанольного раствора 0,2 %). Предохраняют от действия атмосферного воздуха в течение титрования.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора метилата лития соответствует 24,23 мг тиопентала C11H18N2O2S.
2. Натрий
Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до перехода жёлтой окраски в красную (индикатор – 0,1 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %). Раствор кипятят в течение 2 мин и при необходимости дополнительно титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до красной окраски.
Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 2,299 мг натрия Na.
ХРАНЕНИЕ
В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.
*Приводится для информации.
**Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.