ФС.2.1.0660. Десмопрессина ацетат

утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 20.07.2023 г. N 377

Дата введения в действие: c 01.09.2023 г.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

 

 

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Десмопрессина ацетат	ФС.2.1.0660
Десмопрессин
Desmopressini acetas	Вводится впервые

 

C46H64N14O12S2·xC2H4O2	М.м. 1069,2 (основание)
[16679-58-6]

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

S1,S6-Цикло[(3-сульфанилпропаноил)-L-тирозил-L-фенилаланил-L-глутаминил-L-аспарагинил-L-цистеинил-L-пролил-D-аргинилглицинамида] ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % десмопрессина C₄₆H₆₄N₁₄O₁₂S₂ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый аморфный порошок.

Растворимость. Растворим в воде, в спирте 96 % и уксусной кислоте ледяной.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика десмопрессина на хроматограмме раствора стандартного образца десмопрессина (раздел «Количественное определение»).

2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1, анализ по методу 1, 2, 3 или 4). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну шестую суммарного мольного содержания аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, аргинина и фенилаланина, по формуле:

где	ni	–	количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;
		–	сумма мольного содержания аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, аргинина и фенилаланина, мкмоль

Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: аспарагиновая кислота 0,90 до 1,10; глутаминовая кислота от 0,90 до 1,10; пролин от 0,90 до 1,10; глицин 0,90 до 1,10; аргинин от 0,90 до 1,10; фенилаланин 0,90 до 1,10; тирозин от 0,70 до 1,05; полуцистин 0,30 до 1,05. Лизин, изолейцин и лейцин должны отсутствовать (не более 0,01). Остальные аминокислоты (треонин, серин, аланин, валин, метионин и гистидин) могут присутствовать не более чем в следовых количествах (не более 0,03).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От –72 до –82 в пересчёте на безводное и свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество (0,2 % раствор субстанции в уксусной кислоте раствора 1 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,5 до 6,5 (0,1 % раствор, ОФС «Ионометрия»,метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаз А (ПФА). 0,067 М фосфатный буферный раствор рН 7,0.

Подвижная фаз Б (ПФБ). Ацетонитрил—ПФА 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца окситоцин/десмопрессин валидационной смеси растворяют в 0,5 мл воды.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка	120 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	25 °С;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы	50 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0–4	76	24
4–18	76 → 58	24 → 42
18–35	58 → 48	42 → 52
35–40	48 → 76	52 → 24
40–50	76	24

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Десмопрессин – 1 (около 16 мин); окситоцин – около 1,06.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

— разрешение (R_S) между пиками десмопрессина и окситоцина должно быть не менее 1,5;

— фактор асимметрии пика (A_S) десмопрессина должен быть не более 2,0;

— относительное стандартное отклонение площади пика десмопрессина должно быть не более 10,0 % (5 введений);

— относительное стандартное отклонение площади пика окситоцина должно быть не более 10,0 % (5 введений).

Допустимое содержание примесей. Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

— любая примесь – не более 0,5 %;

— сумма примесей – не более 1,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 20 мг (точная навеска) субстанции.

Уксусная кислота. От 3,0 до 8,0 % (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси ПФБ—ПФА 5:95 и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины. Не более 500 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

Подвижная фаза. ПФА—ПФБ 60:40.

Раствор стандартного образца десмопрессина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца десмопрессина, прибавляют 15 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия:

Скорость потока

2,0 мл/мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца десмопрессина и испытуемый раствор.

Время удерживания десмопрессина – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца десмопрессина:

— фактор асимметрии пика (A_S) десмопрессина должен быть не более 2,0;

— относительное стандартное отклонение площади пика десмопрессина должно быть не более 10,0 % (5 введений);

— эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику десмопрессина, должна составлять не менее 500 теоретических тарелок.

Содержание десмопрессина C₄₆H₆₄N₁₄O₁₂S₂ в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество (X) вычисляют по формуле:

где	S1	–	площадь пика десмопрессина на хроматограмме испытуемого раствора;
	S0	–	площадь пика десмопрессина на хроматограмме раствора стандартного образца десмопрессина;
	а1	–	навеска субстанции, мг;
	а0	–	навеска фармакопейного стандартного образца десмопрессина, мг;
	W	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
	A	–	содержание уксусной кислоты в субстанции, %;
	P	–	содержание десмопрессина в фармакопейном стандартном образце десмопрессина, %.

ХРАНЕНИЕ

В сухом защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

 

*Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.